Tris（77-86-1）与磷酸盐缓冲液的选择

Tris和磷酸盐都是很常用的缓冲液，它们有相同的地方也有很多不同的地方，如何能在使用时正确分辨和选择，这也是难倒了一批人。我们今天就先从它们各自的应用及使用环境讲起。让你能很直观的感受到它们的区别。

Tris缓冲液

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值；在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值；被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂；Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成；在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，可用于DNA的稳定和存储；将调节pH值的酸溶液换成乙酸，获得“TAE缓冲液”，换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。

磷酸盐缓冲液

一般的有活性的生物制剂都要用磷酸盐缓冲溶液来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整适宜pH值的缓冲作用。蒸馏水不具有盐平衡作用，会破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是先选。当然，有的生物活性物质需要的条件比较高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持合适的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。因此PBS主要用于细胞实验，其缓冲范围最适宜在中性（7.0）。

在生物化学实验中要慎重地选择缓冲溶液，不仅要考虑缓冲液的缓冲范围，还要综合考虑缓冲液的使用环境：

1. 磷酸盐缓冲溶液的缓冲范围比较宽，但是它在pH7.5以上时缓冲能力很小；Tris本身呈碱性，可以只用Tris-HCl缓冲体系即可配制pH范围由酸性到碱性的缓冲液，方法也较为简单，对于不同的实验，Tris还可以与其他物质组成多种缓冲体系。

2. 磷酸盐缓冲溶液易与常见的Ca2+离子、Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀，同时会抑zhi某些生物化学过程以及多数酶的活性，包括激酶，磷酸化酶，脱氢酶等；相比之下Tris缓冲溶液对生物化学过程干扰很小，也不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。若反应体系中存在金属离子或者酶制剂，则以Tris缓冲溶液为较优选择。

3. Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较磷酸盐缓冲溶液大，同样稀释十倍，磷酸盐缓冲溶液的pH值变化小于0.1，而Tris缓冲液的pH值变化则大于0.1。因此对于体积变化较大的反应体系，则应慎重使用Tris 缓冲液。

4. 另外，Tris缓冲溶液受环境影响较大。一般来说，温度每升高一度，pH值下降0.03； 同时其易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。