基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry),MALDI是软电离的原理,一般用来分析生物大分子,比如细 菌、病毒、蛋白质、DNA、糖化血红蛋白等,也可以用来做病理切片的质谱成像。
糖基化是向蛋白质和其他生物分子中添加碳水化合物分子的过程,是在生命系统中发现的z常见的翻译后修饰之一。据一些估计,人体中发现的蛋白质中有50%以上是通过糖基化修饰的。存在许多糖基化途径,因为它们的多样性不jin 限于糖的身份;它们的连接键(O或N连接的聚糖),链长(多糖键的长短)和聚糖链的支链也可能不同。糖基化分子在细胞识别中起着至关重要的作用,因为细胞用来彼此区分的是细胞表面的聚糖。由于某些遗传性疾病,获得性(非遗传性)疾病和癌症具有特定的细胞表面聚糖谱,因此可以利用它来确定单个细胞和整个生物的健康状况。准确鉴定,分类和检测这些聚糖可以改 善诊断,并指导从业人员为其患者寻求z有效的疗法。
在进行MALDI-TOF-MS分析之前,需要从与之共价键合的蛋白质上切除聚糖成分。 从母体蛋白中提取聚糖的化学和酶促途径均存在。 这些提取完成后,即可使用固相提取(SPE)进行聚糖本身的分离。 在这种情况下,例如,固相吸附剂将选择性地结合在中性条件下存在于溶液中的聚糖,但会在酸性条件下释放它们,从而使聚糖从本体溶液中分离出来。 分离后,分析物可能必须溶解在与质谱兼容的替代溶剂中,这需要干燥步骤。 对于MALDI电镀,需要将基质和分析物混合物小心地添加到MALDI板上,这些添加的顺序和时间在所得质谱图的质量中起着重要作用。
完成MALDI-TOF-MS的步骤都需要人工干预,并且可能非常耗时。对于MALDI点样,样品的镀层是一项微妙而费力的工作,需要跟踪板上的分析物和基质混合物。由于这些原因,许多实验室都转向自动化液体处理工作站,以自动化其样品制备来进行质谱分析。这些系统增加了工作流程和通量,提高了整体实验室效率和样品周转时间。如果您想进一步了解这些液体处理工作站如何简化您的流程,请与我们的Aurora团队联系。
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