细胞培养的步骤及注意事项
一、 复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、 传代
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。
三、 冻存把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃
30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。 冻存液的配制: 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.
DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
细胞培养的步骤及注意事项,先和大家介绍到这,如果想要了解更多离心管的信息,可以关注天津本生生物,业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材,欢迎广大客户来询。
细胞培养的步骤和注意事项您需知 一、 复苏 1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融
NEST 细胞培养系列/培养板 独立包装 TC处理本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材
96孔板(PCR板,深孔板/磁套,细胞培养板)天津本生生物供应:移液器吸嘴,离心管,冻存管,培养皿,试剂盒,
96孔板(PCR板,深孔板/磁套,细胞培养板)天津本生生物供应:移液器吸嘴,离心管,冻存管,培养皿,试剂盒,
大规模干细胞培养用什么看?细胞工厂显微镜MI52-CF_倒置显微镜 要大规模获取干细胞必然需要进行体外扩增,细
1、什么是 ibiTreat 表面? ibiTreat 是一种物理表面处理,可改善细胞在 µ-
目:动物细胞培养与微生物细胞培养的区别·答案要具体点·要列出一二三四五条来·我不要ctrl+v来的答案·.
利用微流控技术在微流控芯片通道内进行实时的细胞培养对很多生物学、医学等领域的工作人员来讲是一个重大的挑战和机
本应用简要提出了一种微流体心肌细胞培养模型(microfluidic cardiac culture model,
标准的目标校准包括两方面:1)确认校准系数;2)检查零点和跨度。仪器在出厂时做过精确校准。校准系数相对稳定,