导读
说起引物，大家都再熟悉不过了。引物，在核苷酸聚合作用的起始时，可以刺激合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中，引物是一段短的单链RNA或DNA片段，可结合在核酸链上与之互补的区域，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点，核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。无论是做普通PCR还是荧光定量PCR，设计合适的引物是非常关键的一步。
普通PCR和荧光定量PCR的检测方式具有较大的差别。荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通PCR通过检测插入DNA中核酸染料的量来测定PCR产物量。荧光定量PCR可以通过扩增曲线进行精确定量，普通PCR则是通过电泳的方式进行定性分析。那么在普通PCR和荧光定量PCR的引物设计方面，有什么相同点和不同点呢？今天小编就给大家汇总一下。
相同处：
▶ 序列的查找是一致的。
▶ 序列选取应在基因的保守区段。
▶ 选取合适的扩增片段大小。
▶ 避免引物自身或与引物之间形成4个或4个以上连续配对。
▶ 避免引物自身形成环状发卡结构。
▶ Tm值在55－65℃，GC含量在40%－60%。
▶ 引物之间的Tm相差避免超过2℃。
▶ 引物的3’端避免出现3个或3个以上连续相同的碱基。
不同处：
荧光定量PCR 引物
▶ PCR产物长度：要求在300bp以内，一般选80-150bp之间。
▶ 引物特异性：对引物要求高，尽量减少引物二聚体的产生，熔解曲线要求单一产物。
▶ 扩增效率：荧光定量 PCR的目的是进行定量或者相对定量，扩增效率应在90%—110%之间。
▶ 多对目的基因同时扩增，文献上查来的引物条件会不同，需要设计尽可能条件一致的引物。
▶ 目的基因含量比较低时，需要设计灵敏度比较高的引物。
普通PCR 引物
▶ 普通PCR的扩增长度，根据实验的要求不同，一般是从150bp到几千bp不等。
▶ 相对于荧光定量PCR，普通PCR对二级结构要求较低。
▶ 对扩增效率要求不高。
▶ 可以选用梯度PCR仪，选择不同退火温度，对引物退火温度要求不需要一致。
Cielo™实时荧光定量PCR系统
Harness of the power of qPCR
☑ 数据可靠性：连续1000次实验后，结果高度一致。
☑ 应用灵活性：提供多种qPCR应用分析。
☑ 流程智能化：中英文用户界面，触控操作，可多机联用。
☑ 在线便捷性：主机可独立运行qPCR程序，数据可USB、Wi-Fi等网络传输。
用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增，模板DNA是什么呢？ 如果是真核细胞中提取的
引物是分子生物学实验中必不可少的部分，它通常是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与靶区域一端的一条DNA模
理论上是可以的，做杂交时有的probe就是用的RNA。 实际上PCR的引物是不会用RNA的，不只是因为RNA
对于做分子生物学实验的科研人员来说，引物探针是一个无比熟悉的词语。不管是普通的PCR、实时荧光定量PCR（q
使用高压差分探头进行测量对电源工程师
近年来，我国IVD产业发展迅速，国内市场容量向千亿元级迈进。分子诊断作为体外诊断（IVD）领域发展最快的细分
单反的大小是多少×多少毫米，而普通的是1/1.8，1/2等。。请问这之间是什么关系 一般数码相机的CCD
工业相机是做什么用的，跟普通的照相机有区别吗？老师说下次做项目可以用到，并让举例说明？求各位前辈帮助一下，
复合氨基酸和普通氨基酸片有什么区别？ 我想利用它来，哪中比较好？？？ 复合氨基酸和普通氨基酸片没有区
听说点阵LED就是在面板后面有N个LED非常多，可以真的实现每个区域的亮度调节，普通LED就是在液晶的边框
沪公网安备 31011502008050号
