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  • 极限条件全能王,Altura PLRP-S 搞定生物大分子分析

    安捷伦 PLRP-S 采用聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)聚合物填料,从基质上就解决了硅胶柱的固有问题。

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在进行生物大分子反相分离时,传统不锈钢色谱柱常面临诸多挑战:

新柱要反复进样钝化,导致前面十几甚至几十针信号忽高忽低,数据不敢用,极端情况甚至会出现峰丢失。

相邻洗脱组分之间的分离度差,峰拖尾,回收率低。

究其原因,一方面是多数反相色谱柱采用硅胶基质固定相以实现多种选择性,但是表面残留的硅醇基与待测样品的碱性残基会发生相互作用,导致峰拖尾;此外,不锈钢柱管表面的金属活性位点仍会与分子之间发生非特异性吸附,使得分离性能大打折扣。


安捷伦 PLRP-S 采用聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)聚合物填料,从基质上就解决了硅胶柱的固有问题。PLRP-S 填料天生更适合生物大分子:



特性优势
无硅醇基不存在硅胶柱的硅醇基,避免碱性化合物拖尾问题
化学稳定性强pH 1–14 稳定,耐高温、耐酸碱,可强再生
1000Å 大孔径减少大分子扩散阻力、体积排阻效应,显著提升柱效


升级到 Altura 超高惰性 PLRP-S 1000 Å 色谱柱可将钝化时间直接提速 6 倍,回收率也是显著提升,实现“强强联合”。


从 20针 → 3 针,

钝化时间缩短至约 1/15,效率提升 6 倍以上

在分析 ADC 戈沙妥珠单抗时,Altura PLRP-S:第 3 针即达稳定信号,传统不锈钢 PLRP-S 柱:需近 20 次进样钝化才能获得稳定信号,前几针甚至“不出峰”。

图 1. 进样 1 μL 浓度为 0.05 mg/mL 的样品时,Altura PLRP-S 1000 Å 色谱柱(蓝色)和不锈钢 PLRP-S 1000 Å 色谱柱(橙色)的钝化情况


在分析赫赛汀单抗时,Altura PLRP-S 新柱甚至无需钝化,连续三针进样的 LC-MS 信号重现性良好,质谱信号稳定。这意味着上机就能出可靠数据,不浪费样品、不耽误时间。




生物大分子质谱定性/定量分析神器

使用蛋白分子进行分离对比,在相同分离条件下,Altura PLRP-S 峰更对称、拖尾显著减少,改善了分离度


图 2. Altura PLRP-S 1000 Å 色谱柱(黑色)和不锈钢 PLRP-S 1000 Å 色谱柱(蓝色)对分离与拖尾对比图。


此外,Altura 超惰技术使得样品回收率显著提升:对于蛋白类分子,Altura PLRP-S 色谱柱相较于不锈钢柱管色谱柱回收率提升约 5-15%,针对 GLP-1 多肽时,回收率提升近 100%。



结语

Altura 超高惰性硬件解决了“流路”的问题,实现了零吸附、高回收;PLRP-S 填料解决了“固定相”的问题,避免拖尾,改善峰形。二者合一,形成了一种高度稳健且可靠的生物大分子反相分析的理想方案。


标签:安捷伦

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