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  • 氨基酸分析“柱”力提高生物制药关键质量属性

    本篇文集将分别从入门指南篇、AdvanceBio 全流程解决方案、AdvanceBio AAA 色谱柱分类介绍如何确保氨基酸分析获得优异的选择性,以助力获取准确的分析结果。

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本篇文集将分别从入门指南篇、AdvanceBio 全流程解决方案、AdvanceBio AAA 色谱柱分类介绍如何确保氨基酸分析获得优异的选择性,以助力获取准确的分析结果。精准定量氨基酸分析研究的完整工作流程及应用案例,进而“柱”力提高生物药行业关键质量属性。


入门指南篇

AdvanceBio 氨基酸分析柱使用了 C18 硅胶颗粒填料,该填料经过化学改性,具有高 pH 稳定性。氨基酸分离在高 pH 条件下效率更高,并且这种改善相比于之前的氨基酸分析解决方案显著延长了色谱柱在这些流动相条件下的使用寿命。为了尽可能发挥这一改进的优点,注意切勿将色谱柱储存在流动相 A 中。短期储存应置于流动相 B 中;长期储存应置于 100% 乙腈中。


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安捷伦 AdvanceBio 全流程解决方案

助您获得准确的分析结果

Agilent AdvanceBio 氨基酸分析(AAA)全程解决方案将 Agilent InfinityLab 系列液相色谱仪和色谱柱技术的优势与成熟的柱前衍生化相结合,有助于优化工作流程效率。它是 AdvanceBio 系列产品中的一员,旨在为蛋白质、抗体、偶合物、新生物实体和生物药物的完整表征提供一致、卓越的性能。


这一完善的单供应商解决方案(包括化学品/标准品、色谱柱和应用支持)可实现快速、灵敏的自动化氨基酸分析。该方案是基于最新的 InfinityLab 系列液相色谱仪和色谱柱技术。Agilent 1290/1260 Infinity II 样品瓶进样器的自动化在线衍生化省略了繁琐的手动操作流程,能够提供可重现的反应结果。AdvanceBio AAA 色谱柱的分析速度和分离度与亚 2 µm 色谱柱相当,而反压仅为亚 2 µm 色谱柱的 50%,并减少了色谱柱堵塞问题。


AdvanceBio AAA 溶液由用于氨基酸衍生化的经过验证的邻苯二甲醛/9-芴甲氧羰酰氯(OPA/FMOC)试剂发展而来。这些试剂与 AdvanceBio AAA 色谱柱和标准品结合,提供了一种兼具分析速度和灵敏度的理想氨基酸定量和定性分析方法。根据本文所述的方案使用时,AdvanceBio AAA 溶液能够帮助用户分离通常存在于蛋白质/肽水解产物中的氨基酸


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AdvanceBio AAA 色谱柱

可确保氨基酸分析获得优异的选择性

AdvanceBio AAA 色谱柱基于安捷伦创新的 2.7 µm 表面多孔颗粒填料(SPP)Poroshell 技术,这种颗粒填料由 1.7 µm 的实心核和 0.5 µm 的多孔壳层组成。


2.7 µm SPP 的柱效为亚 2 µm 全多孔颗粒填料的 80%–90%,而反压比后者降低了 40%–50%。与全多孔颗粒填料相比,SPP 具有更窄的粒径分布,这使柱床更均匀,并能减小色谱柱中的扩散。同时,较薄的多孔壳层实现了较低的传质阻力。此外,由于色谱柱中含有一个 2 µm 筛板,因此它们的抗堵塞能力与 3.5 µm 和 5 µm 色谱柱相同。


直到目前,所有二氧化硅型 SPP 材料在 pH 较高的缓冲液(包括磷酸盐缓冲液)中的寿命仍然有限。为获得更长的寿命,必须对基础颗粒填料进行表面改性或特殊的键合改性。使用独特工艺对表面进行化学改性,形成一个有机层以避免硅胶在高 pH 条件下溶解。


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快速稳定的氨基酸分离

具有亚 2 µm 色谱柱的速度和分离度,反压最多降低 50 %

采用 2 µm 筛板,使色谱柱对“脏”样品的耐受性更强

独特的化学改性,具有高 pH 稳定性和更长的色谱柱寿命

保护柱选件可延长色谱柱寿命,减少您的运行成本


效率始终如一,分析信心十足

能够在 600 bar 和 5 mL/min 下运行,具有更快的速度和更高分离度

具有进样器编程功能,可实现自动化在线衍生化

基于二极管阵列技术的高灵敏度紫外检测,在同步多波长检测中具有出色的灵敏度

在鉴定和峰纯度分析中可选用全谱检测

可灵活用于其他 LC 或 UHPLC 应用,与 HPLC 完全兼容


订购信息

安捷伦提供各种色谱柱,

可满足您的氨基酸分析所需:


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此外,本篇应用文集中还包含细胞培养基和蛋白质水解产物标准品中氨基酸组分的测定、使用 Agilent AdvanceBio AAA 色谱柱进行自动化氨基酸分析等应用简报。


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