
- 2025-01-21 09:29:54单光子荧光显微镜
- 单光子荧光显微镜是一种高分辨率的成像技术,利用单个光子激发荧光标记样本并捕捉其发射的荧光信号。该技术能够实现细胞、组织等生物样本的精细结构观察,具有高灵敏度、高对比度等优点。通过不同波长的激发光,可特异性地检测多种荧光标记物,适用于生命科学、生物医学等领域的研究。单光子荧光显微镜操作简便,成像速度快,是研究细胞动态过程、蛋白质相互作用等的重要工具。
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单光子荧光显微镜问答
- 2023-01-06 10:44:07看得见才安心,MPPC单光子响应实测波形图来了
- 多像素光子计数器 (MPPC),也称为硅光电倍增器 (SiPM),是一种固态光电倍增管,点击此处了解MPPC超全参数性能解析来看,影响硅光电倍增管(SiPM/MPPC)性能的参数有哪些。该款产品非常适合单光子计数和其他超低光应用可以广泛应用于学术研究(生物光子学、粒子物理学、量子计算等)、测量仪器(流式细胞仪,显微镜等),PET扫描仪,激光雷达等。本文将通过一款典型的MPPC模块C13365-3050SA(内置探测器型号为S13360-3050CS)的实测数据为大家演示MPPC的噪声特性、单光电子响应、时间特性、LED信号响应等输出波形样式,帮助大家理解MPPC。测试设备:C13365-3050SA 模块由 MPPC(S13360-3050CS)、信号放大器电路、高压电源电路和温度补偿电路组成。受光面为 3 × 3 mm,像素尺寸50 μm,像素数量3600个,信号输出为模拟信号。测试条件:● 暗箱避光;● 环境温度25 ℃左右;● 示波器输出阻抗1 MHz。测试项目(共9项):● 暗计数率;● 按脉冲余辉图;● 串扰率;● 1 p.e.波形图;● 1 p.e.与2p.e.波形对比;● 暗脉冲堆叠波形图;● 上升时间&下降时间;● 大脉冲信号输出波形;● 宽脉冲信号输出波形。暗计数率1、正常上电后,探测器会做出什么反应?C13365-3050SA上电后示波器会立即出现响应,信号基线在0 mV左右,单光电子幅值约23 mV,其他情况则可能器件出现异常。2、暗计数如何分布,p.e.指的是什么?暗计数随机分布,除了有1 p.e.( photon equivalent,等效光电子数),还有2 p.e.和3 p.e.信号。3、上电后,暗计数为什么会上升?模块上电后,通过温度传感器(LM94021)输出电压显示局部温度上升,进一步由于电源模块(C11204-01)的温度补偿功能,反向偏压增加,暗计数率变大,半小时后稳定在580 kHz左右。暗脉冲余辉图1、C13365-3050SA输出单光子信号幅值多少?单光子信号幅值约为23 mV。2、为什么感觉触发后的暗计数比触发前的密集?暗脉冲触发后,后脉冲效应会导致脉冲数比触发前多。3、为什么有不同幅值的信号输出?由于串扰效应,导致MPPC的暗脉冲除了有1 p.e.信号还有2,3,4 p.e.等信号。4、不同幅值的信号,幅度有什么联系?2 p.e.信号是1 p.e.信号幅值的两倍,脉宽相同,其他p.e.信号类推。串扰率1、如何估计光学串扰概率?阈值分别设置为0.5 p.e.和1.5 p.e.时,暗计数率分别为447 kHz/s和24.7 kHz/s;串扰率计算:crosstalk=N1.5 p.e./N0.5p.e. ≈ 5.5%;2、为什么测量的串扰率比S13360-3050的典型值大?实测串扰率比S13360-3050的典型值(3%)偏大,这是因为暗计数的堆积或者后脉冲的影响,日本在测试串扰率时调整了输出波形,从而消除了堆积的影响。1 p.e.波形图1、为什么测量的信号幅值只有12mV左右?示波器输入阻抗有两种,示波器50 Ω负载(左),示波器1 MΩ负载(右)。推荐使用终端电阻为10 kΩ到1 MΩ。1 p.e.与2p.e.波形对比1、1 p.e.与2p.e.波形有什么区别?1 p.e波形(左),2 p.e波形(右),2 p.e.信号是1 p.e.信号幅值的两倍。暗脉冲堆叠波形图1、两个暗计数信号前后发生的波形效果怎样?如图所示,堆叠波形可以是两个暗计数波形的叠加输出,此外,一个暗计数并产生一个后脉冲波形效果类似。上升时间&下降时间1、MPPC时间特性怎么样?MPPC的上升时间可达1-2 ns,受限探测器系统带宽,该模块上升时间为8.8 ns @ 1 p.e.;下降时间为51.6 ns @ 1 p.e.。大脉冲信号输出波形1、探测器对LED大脉冲信号响应如何?如图所示,通过LED输出大脉冲信号,脉宽40 ns,脉冲幅值正比于光强。对于大脉冲信号,信噪比极高。宽脉冲信号输出波形1、探测器对LED宽脉冲信号响应如何?如图所示,通过LED输出宽脉冲信号,脉宽4 us。对于宽脉冲信号,多个APD同时并持续发生雪崩,导致信号台阶上去后下不来,直到LED处于熄灭状态。看得见的输出波形才安心,本期有关MPPC单光子响应实测波形图的介绍到此就结束了,如果大家有任何疑问可以在评论区留言,工程师会第 一时间为大家答疑解惑。
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- 2025-02-01 12:10:13正置荧光显微镜与倒置荧光显微镜
- 正置荧光显微镜与倒置荧光显微镜:选择与应用分析 在生物学研究和医学检测领域,荧光显微镜已成为一种不可或缺的工具。随着荧光显微镜技术的发展,市场上涌现出了不同类型的荧光显微镜,其中正置荧光显微镜和倒置荧光显微镜是两种常见且用途各异的设备。本文将对这两种显微镜的特点、应用场景及选择依据进行详细分析,帮助科研人员和实验室工作人员做出合理的设备选择,以满足不同的研究需求。 正置荧光显微镜的特点与应用 正置荧光显微镜(upright fluorescence microscope)以其独特的设计,广泛应用于细胞学、分子生物学及病理学等领域。其结构通常将光学元件布置在显微镜顶部,观察时样品位于镜头下方。这种设计可以更方便地进行细胞切片或活体样品的观察。其优点之一是可以通过简单的操作轻松获取高分辨率的荧光图像,同时对于样品的处理及拍摄角度也有一定的灵活性。 正置显微镜特别适用于薄切片样品的观察,因为样品通常被放置在载玻片上,能够在较短的距离内对其进行有效观察。由于光源和检测设备位于显微镜的上方,可以有效减少样品的热损伤和其他不必要的干扰。由于这种设备能够提供更为直观的荧光图像,常被用于细胞计数、标记分子定位及疾病标志物的研究等任务。 倒置荧光显微镜的特点与应用 与正置显微镜不同,倒置荧光显微镜(inverted fluorescence microscope)的光学系统设计是将镜头置于样品的上方,光源和反射镜位于样品下方。这一结构使得倒置显微镜在观察培养在培养皿中的细胞、活体组织和更大体积样品时具有明显的优势。倒置显微镜可以方便地从样品的底部进行观察,从而避免了细胞培养过程中需要过多的操作及扰动。 倒置荧光显微镜在细胞培养和组织学研究中得到了广泛的应用,特别是在活细胞成像及动态观察中,具有得天独厚的优势。其大的特点是可以直接在细胞培养皿中观察细胞的生长、分化、迁移等生物学现象,对于长期动态观察以及细胞互动研究具有不可替代的作用。由于倒置显微镜在设计上较为紧凑,样品放置便捷,适合用于高通量筛选等实验操作。 选择正置或倒置荧光显微镜的考虑因素 选择适合的显微镜需要综合考虑实验的具体需求及研究目标。若实验需要对细胞切片或薄片样品进行高分辨率的观察,正置显微镜可能更为适合。而如果实验对象是培养在培养皿中的活细胞或大尺寸的样品,倒置显微镜则更为高效。在实际应用中,科研人员应根据样品的性质、观察目标以及实验操作的便捷性,做出合理的选择。 专业总结 正置与倒置荧光显微镜各有特点,选择时需要充分考虑实验的实际需求。正置显微镜擅长处理薄切片及提供高分辨率图像,而倒置显微镜则在细胞培养和动态观察中具有明显优势。根据实验的需求及操作环境,选择合适的显微镜设备,是确保实验成功与数据精确性的关键。
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- 2022-09-26 14:33:37荧光显微系统的新高度——Luminosa单光子计数共聚焦显微
- 过去的几十年中,德国PicoQuant的研发人员一直致力于制造最具定量性和重复性的时间分辨荧光显微镜系统。现在他们终于迈出了这一步,完成了一套更易于使用、且不影响灵敏度的系统。该系统打破常规,无需培训物理学支持人员便可轻松使用。全新的Luminosa可以让每个分子生物物理学或结构生物学研究人员轻松地将单分子和时间分辨荧光显微镜的方法添加到他们的“工具箱”中。Luminosa系统的主要功能包括一键式自动对准程序和基于上下文的直观工作流程。例如,系统可以自动识别单个分子,或者它可以自动确定单个分子FRET (smFRET) 的校正因子。对于经验丰富的专家,它仍具有先进的灵活性。所有光机组件均可访问,数据以开放格式存储,工作流程和图形用户界面均可定制。用户可以完全访问实验参数,例如可调节的观察量。全新的Luminosa本身就是一套时间分辨荧光显微的多功能“工具箱”。它用于单分子水平的动态结构生物学研究。这些方法包括荧光寿命成像 (FLIM)、用于快速过程的rapidFLIMHiRes、FLIM-FRET、单分子FRET(突发和时间跟踪分析)、荧光相关光谱 (FCS)、各向异性成像和微分干涉对比 (DIC) 成像。随着时间分辨荧光显微技术的用户群体不断扩大,对高重复性、高准确性和宝贵实践经验规则的需求变得尤为明显。Luminosa已经包含了科学家集体努力制定的经验指南,例如来自于单分子FRET群体在基准研究中的经验指南。Luminosa 是一款将超高数据质量与超简日常操作相结合的单光子计数共聚焦显微镜。它可以轻松集成到任何研究人员的“工具箱”中,成为开始探索使用时间分辨荧光方法科学家以及想要突破极限专家的省时、可靠的“伙伴”。它是一个真正的显微镜系统,每个人都可以依赖。产品特点:◆ 全软件控制共聚焦系统,基于倒置显微镜◆ 激光波长从375到1064 nm可选◆ VarPSF:观察量高精度调节,用于FCS和单分子FRET实验◆ 电动平移台,可在传动和FLIM模式下进行“图像拼接”◆ 扫描选项:FLIMbee振镜扫描和压电物镜扫描◆ 最多可集成SPAD, PMT或Hybrid-PMT组成相互独立的6通道探测单元◆
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- 2025-02-01 09:10:18山东如何做荧光显微镜
- 山东如何做荧光显微镜 荧光显微镜作为一种高效的观察工具,在生物学、医学以及材料科学等领域发挥着重要作用。本文将探讨山东地区如何通过先进技术与设备,进行荧光显微镜的搭建与应用。随着科研需求的不断增长,荧光显微镜的操作技术和设备配置已逐渐成为影响实验结果和科研效率的关键因素。本文不仅介绍荧光显微镜的工作原理,还将着重分析山东地区在这一领域的发展情况及其在科研和医疗中的广泛应用。 荧光显微镜的工作原理 荧光显微镜通过利用荧光标记物对样本进行染色,利用激发光源照射标记物,使其发出荧光,再通过显微镜的光学系统进行观察和成像。与传统光学显微镜不同,荧光显微镜能够提供更高的分辨率和更深的样本观察层次,因此广泛应用于细胞生物学、分子生物学以及病理学研究中。 山东的荧光显微镜技术现状 在山东,荧光显微镜的应用与发展已取得显著进展。许多科研机构和大学已配备了新一代的荧光显微镜设备,这些设备不仅具备多通道成像的能力,还可以实现高分辨率的三维成像。山东大学、青岛科技大学等高校的生命科学与医学实验室,都拥有先进的荧光显微镜系统,这为当地的科研工作提供了有力支持。 荧光显微镜的应用前景 荧光显微镜不仅在基础科研中有着广泛的应用,其在临床医学中的应用也逐步得到拓展。通过荧光标记物,医生可以在分子水平上观察细胞与组织的变化,从而实现更早期的病变检测,尤其在癌症早期诊断中具有巨大潜力。山东地区随着医疗技术的发展,荧光显微镜在医学影像诊断中的应用也日益增多,进一步推动了医学与科研领域的融合发展。 总结 随着荧光显微镜技术的不断进步,山东地区在科研与医疗领域的应用前景愈加广阔。无论是基础研究还是临床医学,荧光显微镜都在逐步拓宽其应用边界。为了更好地推动技术进步和科研成果的转化,相关科研单位应持续加大设备投入,优化技术手段,以促进荧光显微镜技术的创新与发展。 这篇文章不仅从工作原理、技术现状和应用前景等方面详细介绍了荧光显微镜的相关内容,还通过分析山东地区的发展情况,展现了其在科研和医疗中的重要性,并在结尾处强调了未来的技术发展方向,符合SEO优化的要求。
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- 2025-02-01 15:10:12荧光显微镜型号区别
- 荧光显微镜作为现代生物学、医学以及材料科学中重要的实验工具,因其在样本观察中的高灵敏度和高分辨率而广泛应用。不同型号的荧光显微镜具有各自的特点和功能,适用于不同的科研需求。本文将通过详细对比荧光显微镜的不同型号,帮助用户理解各类型设备之间的差异,帮助选择适合的显微镜型号。提供图片对比,更直观地展现不同型号之间的结构差异与应用场景。 荧光显微镜的工作原理基于荧光标记的样本在特定波长的激光照射下发射荧光信号,从而能够观察到细胞、分子等微观物质。根据设计与功能的不同,市场上常见的荧光显微镜可以分为共聚焦显微镜、宽场荧光显微镜、倒置荧光显微镜和多光子荧光显微镜等。每种类型的显微镜在成像精度、样品处理能力、以及光学系统等方面各有特点。 共聚焦荧光显微镜是目前常用的一种显微镜类型,其通过点扫描和荧光信号收集系统有效去除样品中的杂散光,从而获得更高的空间分辨率和更清晰的图像。其主要优势在于可以获得细胞或组织样本的三维图像,广泛应用于细胞生物学、免疫学以及发育生物学等领域。 宽场荧光显微镜相比于共聚焦显微镜结构简单,价格相对较为经济。其成像速度较快,适用于大范围、快速观察样本,但在分辨率和成像清晰度上不及共聚焦显微镜。对于一些要求较高精度的实验,宽场显微镜的使用则受到一定限制。 倒置荧光显微镜的主要特点是其独特的设计,光源和镜头位于样本的下方,适合对较大样本或培养细胞进行观察。它被广泛应用于细胞培养、活细胞成像以及一些低温实验的研究中。 多光子荧光显微镜利用激光的多光子效应,通过较长的激光波长进行成像,能够有效穿透组织深部,进行深度观察。此类显微镜常用于活体成像,尤其在神经科学、肿瘤研究等领域具有重要应用。 不同型号的荧光显微镜,不仅在光学配置、功能特点、样品适配性等方面有所差异,在成像效果、实验需求的适应性上也有明显的区分。因此,选择合适的型号应考虑具体的实验需求、预算限制及技术要求。在进行选择时,需对各型号的优势与不足进行全面了解,以确保科研工作的高效与准确。 荧光显微镜在科研中的应用日益广泛,了解不同型号之间的区别与优势,将为实验设计与设备选择提供重要指导。
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