2025-01-10 17:02:12半复消色差物镜
半复消色差物镜是一种显微镜物镜,它通过特殊的光学设计,有效校正了两种主要色差的影响,即轴向色差和倍率色差,从而提供了比单消色差物镜更高质量的图像。这种物镜适用于中等到高倍率的显微镜观察,特别是在需要高清晰度和色彩还原度的科研、教育及工业检测领域。其设计平衡了成像质量、工作距离和视野范围,是多种显微应用中的理想选择。

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2023-06-25 11:49:58课堂 | 目镜、物镜和光学畸变
对于大多数显微镜应用,通常只有两套光学器件需要由用户调整,即物镜和目镜。当然,这是假设显微镜已经校正了科勒照明,即调整了聚光镜和光阑。本文首先介绍了目镜组件以及如何正确调整它们以适应你的眼睛。其次是物镜,我们将探讨光学畸变和四种最常见的物镜,这些物镜均经过校正以克服这些异常现象。在制造商的设计中,显微镜的目镜和物镜是一个组合,并在光学上相互补充。如果你出于任何原因更换显微镜之间的目镜或物镜,那么应该记住这一点。为获得最 佳的样本图像,显微镜的物镜和目镜必须是一个和谐的工作组合。购买完整的显微镜时,光学部件相互匹配,为用户提供最 佳的观察条件。如果你在组装一个定制的研究级显微镜,那么选择的物镜将决定适合的目镜,反之亦然。目 镜   目镜是我们观察最 终样本图像的光学镜片(见图1)。这些光学器件有时被称为“接目镜”或“目镜”。放大率除了取决于物镜的选择,还要考虑目镜,它的放大率通常是10的倍数。目镜是显微镜的一个看似简单的光学部件。一些基础款目镜确实是由一个顶部和底部安装镜片的金属管组成但许多研究级目镜由多组相互配合的镜片组成,它提供样本的校正视图,并补充物镜的特性。无论目镜的组件设计如何,金属外壳的两端只有两个用户可以看到的镜片。观察最 终图像的镜片(最接近眼睛)被称为“目镜”,另一端的镜片(朝向显微镜主体)被称为“场镜”。图1:显微镜的最 终图像可以用目镜观察,也叫接目镜。你通常会在目镜周围发现橡胶或塑料眼罩(见图2)。这些眼罩有多种功能。它们会阻挡一些环境光线,让观察者可以更清楚地看到感兴趣的样本。此外,它们还将用户限制在与目镜的最 佳距离内。如果您佩戴眼镜,可以简单地将它们卷到目镜的顶部,或者摘掉眼镜。关于显微镜卫生需注意的一点:如果你在共享的实验室或设施中使用显微镜,卫生和清洁都是重要的因素。一个重要的考虑因素是眼部感染。如果你不幸有眼部感染,则应避免使用共享显微镜,直到感染症状完全消失。眼部感染可能具有高传染性,很容易传播给其他显微镜使用者。无论您的眼睛是否健康,您都应该将目镜和眼罩(以及整个显微镜)保持在清洁状态,以便于下一个用户的使用。目镜屈光度的调整  显微镜用户需要调整目镜适应自己的视力。这被称为“屈光度调节”,用于纠正眼睛之间的焦点和视觉差异(见图2)。除非您有完 美的正常视力(也称为“20/20视力”),否则为更清晰地观察样本,您需要完成这一简单的调整。在调整屈光度之前,首先应调整目镜之间的距离(假设您使用的是双目显微镜)以适应使用者的生理结构。双目目镜安装在一个水平的“滑块”上,两个目镜可以活动以适应眼睛之间的距离。或者,每个目镜都安装在独立的外壳中,能够以半圆形的旋转方式移动,配合使用者眼睛之间的距离。设置好物理距离后,就可以调节屈光度。检查每一个目镜时,您会注意到至少有一个目镜的金属体或外壳周围有一个滚花环(另一个也可以是固定焦点目镜)。仅通过固定目镜向下看,并使用显微镜的主调焦轮让样本进入清晰的焦点。闭合固定焦距目镜上的眼睛,仅使用可调节光圈的目镜来观察样本。保持样本的原始焦点的同时,慢慢转动屈光度环,直到样本进入清晰的焦点。当你睁开双眼时,样本现在应该处于清晰的焦点。调整屈光度厚,每个所选物镜的设置都是一样的。图2:大多数目镜都有可移动或可弯曲的眼罩,用于阻挡一些环境光线。此外,它们还可以将用户限制在与目镜的最 佳距离内。佩戴眼镜的用户应该摘下眼罩。借助屈光度调节,可以根据用户的屈光度对目镜进行个性化设置。光学畸变  显微镜(以及在本文的范围内)有两种主要类型的光学畸变:色差和几何像差。几何像差(也被称为“单色差“或“球面像差”)也被称为“塞德尔像差”。菲利普·路德维希·冯·塞德尔(Philipp Ludwig von Seidel)(1821-1896)是一位德国数学家,他在1857年确定了五种几何像差(球差、慧差、像散、场曲和畸变)。一般来说,几何/单色/赛德尔像差是由于镜片的结构和几何形状,以及光在通过镜片时的折射和反射方式而产生。考虑到所有可能通过曲面镜片的光波,通过镜片中心的光波将比通过曲面镜片边缘的光波的折射率低。通过镜面之前平行的光波不会汇聚到一个焦点上,而是作为不同的点沿光轴传播(图3)。图3:球面像差描述了这样一个事实:通过镜片中心的光波比通过曲面镜片边缘的光波的折射率要小。因此,在通过透镜之前是平行的光波不会汇聚到一个焦点上。色差主要是由于镜片的材料而发生的。白光是由许多不同的波长/颜色组成的,当它通过凸透镜时,它被分割成不同的组成部分。波长的分裂意味着,一旦光线通过透镜,各组成颜色就不会彼此聚焦在同一个汇聚点上(图4)。 图4:通过凸透镜的白光被分割成不同的波长,并在不同程度上被折射。因此,它们不会汇聚在同一个焦点上。这种现象被称为色差。物 镜图5:一个带有校正环的甘油浸泡物镜。显微镜物镜的制造和校正是为了在每个光学部件中考虑一个或多个这样的像差。在物镜外壳上蚀刻的信息中(除了放大率、物镜类型、数值孔径(NA)等),还包括有关光学校正的信息(见图3)。尽管有许多可用的光学校正,但本文将探讨可能遇到和使用的四种最常见的光学校正。除了目镜之外,物镜看起来也很简单。物镜两端的两个透镜被称为“前透镜”(离样本最近)和“后透镜”。后透镜在使用过程中不可见,因为它面向显微镜的主体。大多数物镜由一系列相对复杂的镜片组成,镜片相互补充,纠正其他扭曲的光学像差。消色差物镜  最常见的校正显微镜物镜是“消色差”物镜。这种物镜的镜筒上有缩写“Achro”或“Achromat”。这些物镜校正“轴向色差”。当白光通过凸透镜时,会发生这种像差。因此,白光被分割成红、绿和蓝色波长。这种分裂意味着这些波长不会汇聚到光轴上的同一个焦点上(见图4)。如果使用没有校正轴向色差的物镜观察样本,那么样本周围会出现彩色条纹和图像的模糊。非色差物镜只校正了两个波长(红色和蓝色),使其与绿色波长的焦点大致相同。此外,消色差物镜的球面像差也只针对一种颜色进行了校正。平场消色差物镜  更高一级的校正是在“平场消色差”物镜中发现的。这些通常由物镜筒上的缩写“平场消色差”或“Achroplan”来识别。除了校正轴向色差外,这些物镜还校正一种被称为“场曲率”的光学现象。当光线通过曲面镜片时,便会发生这种现象。投射的图像导致样本的视图发生弯曲。如果使用未校正视场曲率的物镜观察样本,会导致整个视场的焦点不均匀。视场的边缘或中心可能被聚焦,但不是同时聚焦。虽然这不会影响样本的日常观察和检查,但如果你想拍摄用于发表的图像,就会有问题。在这种情况下,建议使用平场消色差物镜校正平场,实现整个图像视图的均匀聚焦。半复消色差物镜  再高一级的校正物镜是“半复消色差”或“萤石”物镜。这些物镜由物镜筒上的缩写“Fluar”、“Fluor”、“Fluo”或“Fl”来识别。术语“萤石”可以追溯到一个时期,当时这种镜片是由萤石制造的,它是一种氟化钙矿物。在商业上,这种矿物也被称为“萤石”,并且仍然被用于制造一些半复消色差镜片,尽管现在大多数都是由合成材料制成的。半复消色差物镜对一种或两种组成色进行校正,确保不同的光波集中在一起,成为光轴上所谓的“最小混淆圈”。除了上述外观上的缩写外,还有一些带有“Plan FL”或“Plan Fluor”名称的物镜。这些物镜不仅校正了球差和色差,而且还校正了视场曲率。复消色差物镜  最 高级别的校正物镜(反映在这些光学器件的成本上)是“复消色差”物镜。这些物镜在镜筒上有“Plan Apochromat”、“PL APO”或“Plan Apo”的缩写(见表1)。这些物镜对场曲率进行了校正(因此缩写名称中的“Plan”),并对红、绿和蓝色波长进行了色度校正。此外,复消色差物镜还对三个波长进行了球面校正。在复消色差透镜中的高水平校正,相比校正较少的物镜,在同等放大率下,可产生更高的NA。徕卡的校正物镜关于徕卡不同类别校正物镜的概述,可以通过以下链接找到(见表1)。此外,通过填写页面上的在线表格,徕卡可以帮助您找到您的应用所需的合适物镜。表1:国际标准化组织(ISO)区分了三组物镜类别,它们在色度校正的质量上有所不同。消色差、半复消色差和复消色差。徕卡的命名法进一步区分了这些组别,例如,它们的场平度、透射率等。徕卡物镜上使用的进一步的缩写。表2:特别适用于特定对比法的物镜都有相应的标记。表3:必须与某一物镜一起使用的浸泡介质在物镜上标明。表4:徕卡物镜上提到的更多标签。
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2024-01-15 17:30:19包涵体蛋白复体常见十大问题解析
在生命科学领域中,包涵体复体的研究占据了重要的地位。但随着研究的深入,一些问题逐渐浮现。本文将对包涵体复体研究中常见的挑战进行解析,以及为研究者提供一些解决思路。  ①包涵体复性原则:低浓度,平缓梯度,低温。 ②怎样洗涤包涵体?通常的洗涤方法一般是洗不干净的,可以先把包涵体用6M盐酸胍溶解充分,过滤除去未溶解的物质,注意留样跑电泳,然后用水稀释到4M,离心把沉淀和上清分别跑电泳,如此类推可以一直稀释到合适的浓度,可以找到一个合适去除杂质的办法,其实这就是梯度沉淀的方法,比通常的直接洗脱效果好。 ③对于尿素和盐酸胍该怎么选择尿素和盐酸胍属中强度变性剂,易经透析和超滤除去。它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用,所需浓度尿素8-10M,盐酸胍6-8M。尿素溶解包涵体较盐酸胍慢而弱,溶解度为70-90%,尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐,对重组蛋白质的氨基进行共价修饰,但用尿素溶解具有不电离,呈中性,成本低,蛋白质复性后除去不会造成大量蛋白质沉淀以及溶解的包涵体可选用多种色谱法纯化等优点,故目前已被广泛采用。 盐酸胍溶解能力达95%以上,且溶解作用快而不造成重组蛋白质的共价修饰。但它也有成本高、在酸性条件下易产生沉淀、复性后除去可能造成大量蛋白质沉淀和对蛋白质离子交换色谱有干扰等缺点。 ④8M尿素溶解的包涵体溶液应如何保存?在4度放置半个月,都没什么问题 。在室温放置超过48小时,可能会对目的蛋白有影响,因为尿素在碱性条件下可使一些氨基酸酰基化,所以早些处理BI溶液比较好。 ⑤复性时的蛋白浓度一般使用浓度为0.1-1.0mg/ml,太高的浓度容易形成聚体沉淀,太低的浓度不经济,而且很多蛋白在低浓度时不稳定,很容易变性。 ⑥蛋白复性后浓度低蛋白可能是在复性的过程中发生降解了。 可以将复性好的蛋白浓缩一下泡胶看看。复性过程一般都是低浓度蛋白,需要保证分子间有足够的折叠空间。一些未正确折叠的蛋白就存在于沉淀中,可能沉淀看不出来,复性后的蛋白高速离心看看。 ⑦复性中蛋白析出是怎么回事?该怎么处理?出现蛋白析出,肯定是条件变化太剧烈了。 复性应该采取复性液浓度和PH值逐渐变化的方法,例如根据包涵体的溶液成分,每隔1个PH或浓度值配置一种溶液,逐步透析到正常。此外透析时必须浓度极低,条件温和,使蛋白质能够正确折叠。但是复性的比率应该很低。 若加变性剂尿素可加到2M,盐酸胍可加到1-1.5M; 另外可将甘油浓度增加,范围可在≤30%,且在复性样品中也可加适量甘油。 ⑧复性效果的检测根据具体的蛋白性质和需要,可以从生化、免疫、物理性质等方面对蛋白质的复性效率进行检测。 凝胶电泳:一般可以用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以检测变性和天然状态的蛋白质,或用非还原的聚丙烯酰胺电泳检测有二硫键的蛋白复性后二硫键的配对情况。光谱学方法:可以用紫外差光谱、荧光光谱、圆二色性光谱(CD)等,利用两种状态下的光谱学特征进行复性情况的检测,但一般只用于复性研究中的过程检测。色谱方法:如IEX、RP-HPLC、CE等,由于两种状态的蛋白色谱行为不同。生物学活性及比活测定:一般用细胞方法或生化方法进行测定,较好的反映了复性蛋白的活性,值得注意的是,不同的测活方法测得的结果不同,而且常常不能完全反映体内活性。黏度和浊度测定:复性后的蛋白溶解度增加,变性状态时由于疏水残基暴露,一般水溶性很差,大多形成可见的沉淀析出。免疫学方法:如ELISA、WESTERN等,特别是对结构决定簇的抗体检验,比较真实的反映了蛋白质的折叠状态。 ⑨变性的融合蛋白可以制备多抗或者单抗吗?变性蛋白只是天然蛋白伸直的产物,用来免疫动物具有更强的抗原性。只是天然蛋白中被包在内部的抗原决定簇也会暴露出来,如果用该变性抗原制备的抗体来检测变性抗原是可以的,如果用来检测天然蛋白,可能会有假阳性。做单抗也可以,同样道理,筛选出的单抗可能对抗的抗原决定簇处于天然抗原的内部,是否能用还要看将来该单抗用来干什么。 ⑩纯化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制备多抗吗?免疫动物要求抗原体种尽量小。在这种小体积的情况下,缓冲液里的小分子成分只要没毒影响就不大,可以不用考虑。 更多蛋白复体详情可以上义翘神州网咨询!
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2023-01-31 17:22:47开工大吉|万物复春生,共赴新征程!
新春新气象,新岁新起点。今天是节后上班的第一天,春节的喜庆与热闹还萦绕于心,但新的征程已经开启,元气满满,一路向前短暂的春节假期把一年的疲惫转化为奋斗的源泉2023年1月31日(正月初十)上海净信实业发展有限公司正 式 开 工 啦新年新气象 万事开门红新年伊始,万象更新,整顿好行囊,带上满身的热情再度出发!万物立新春 谱写新篇章站在新的起点上,带着对兔年的美好期许,豪情万丈的净信人斗志十足喊出了霸气的兔年宣言,让未来的一切时刻闪耀成心底的光芒和力量。我们将继续紧跟国家政策,不忘初心。坚信科技创新,提升产品研发能力,以掌握核心技术为重中之重,以用户感受为核心。与各地经销商、代理商及各界朋友携手共进,一起谱写新篇章,创造更多的精彩!
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2022-11-21 11:00:59keithley吉时利DMM7510七位半万用表
简介:公司名称:深圳市科中科仪器有限公司经 理 :谭 生V :一捌二 零柒无无 无伞柒零产品名称: 7位半触摸屏数采万用表 产品名称:     7位半触摸屏数采万用表产品型号:     DMM7510厂商名称:     Keithley(吉时利)产品简述:      keithley DMM7510型仪表实现***的高测量精度、数据可视化和灵活交互性的结合。吉时利DMM7510具有***的信号分析灵活性;5英寸电容触摸显示屏使得它易于观察、交互和测量,具有双指缩放功能。详细描述   keithley DMM7510型仪表实现***的高测量精度、数据可视化和灵活交互性的结合。吉时利DMM7510 具有***的信号分析灵活性;5英寸电容触摸显示屏使得它易于观察、交互和测量,具有双指缩放功能。这个***和易用性组合可以使用户提高工作效率,深入洞察测量。
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2021-05-26 13:34:33倒置显微镜 物镜放大倍数是多少?
倒置显微镜 物镜放大倍数是多少?
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