2025-01-10 10:50:40细胞基因质粒载体菌株
细胞基因质粒载体菌株是基因工程中的关键元素。细胞是生命的基本单位,基因则决定其遗传特性。质粒是一种小型环状DNA分子,能自主复制并稳定存在于细胞中,常作为基因工程的载体。载体菌株则是经过改造能高效接纳、复制并表达外源质粒DNA的细菌细胞。它们共同构成基因转移与表达的系统,用于研究基因功能、生产基因药物等。

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2022-09-10 14:33:21光散射技术在疫苗和基因载体中的应用
光散射技术解决方案:疫苗和基因载体的关键质量属性表征和质量控制01会议详情主题:光散射技术在疫苗和基因载体中的应用时间:2022年9月15日 19:00内容:SEC-MALS、DLS原理讲解DLS、HT-DLS实例应用:AAV/LVSEC-MALS的AAV分析(Vg/Cp)方法FFF-MLAS与SEC-MALS的对比:LNP分析02参加会议会议链接:https://paj.h5.xeknow.com/sl/2gT5z2或扫码加入会议
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2023-02-15 14:19:28【会议邀请】BIONNOVA 细胞与基因治 疗广州论坛开幕在即
会议概况BIONNOVA 细胞与基因治 疗广州论坛将于 2023 年 2 月 21-22 日在广州举办,本次论坛就当前免疫细胞、干细胞、溶瘤病毒、基因编辑等研发路线上的进展和突破、创新疗法的注册申报和临床开发、细胞与基因治 疗生产工艺的技术突破、以及药物开发过程中的分析和质控等议题展开探讨。会议时间:2023 年 2 月 21 日 - 22 日会议地点:广州翡翠希尔顿酒店会议日程:安捷伦作为本次会议的参展商,细胞分析部门将携“基因与细胞治 疗创新性解决方案”,在A08展台期待大家的莅临。
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2023-06-16 14:28:25构建表达载体想降本增效?看这一篇就够了
想要开发有稳定生产能力的细胞株,除了在细胞开发中对于细胞表达能力的评估筛选以外,前期的表达载体的构建过程也非常重要。使用纳升移液技术可以显著提高细胞株过程基因合成,表达载体构建以及转染筛选等实验的实验效率,降低实验成本。声波移液展示Echo®移液系统依靠专 利技术(U.S. Patent 6938995)和创新方法改变移液操作在整个生命科学领域中的应用。它采用动态液体分析(Dynamic Fluid Analysis™, DFA)技术和声波移液(Acoustic Droplet Ejection,ADE)技术,让研究人员能够移取多种不同类型的液体,完成微量小体积(2.5/25nL)的移液工作。全流程无需枪头耗材,无交叉风险。纳升移液技术让细胞株构建更快、更准、更经济更快—— Echo快速任意孔到任意孔移液,极速基因组装在质粒构建前期,需要非常多的准备实验,如基因组装中将不同的DNA片段混合,在检测反应中将不同的样本组合,在NGS文库构建过程中将多个文库pooling到一起,在CRISPr基因编辑中构建sgRNA文库等等,这些实验都需要进行快速、灵活的加样移液,就算使用高通量的移液工作站,往往也要好几小时才能完成。纳升移液技术Echo的任意孔到任意孔的快速移液特点则让此类应用简单、快速化,每次转移花费更少时间更短。这为基因组装节省了高达82%的时间。从母板任意孔转移任意体积样品到目标板任意孔中,实现快速挑选、样品混合和组合。有效缩短实验周期更准—— Echo加样精 准,提高克隆效率利用质粒上含有的抗性选择进行筛选,需要对筛选结果进行鉴定, 而qPCR也是常用的鉴定方法之一。使用Echo纳升移液技术进行微量化克隆筛选鉴定,可以以更少的实际成本精 准完成实验。使用Echo完成 qPCR的反应体系构建,通过减少每个组件的体积,并使用不使用tips的Echo,将反应体积缩小10倍,从10 μL减少到1 μL,成本降低了8倍。精 准减小实验体积更经济—— Echo微量化,缩小反应体系,让新技术更经济系统化的设计必然会带来更大的样本量,从而导致更高的费用, Echo采用声波的能量进行无接触式移液,且每滴液滴仅为2.5nL或25nL,因此可以直接省去吸头耗材的消耗,也可以将检测反应体系降低4-100倍,使成本急剧下降。有效缩减试剂成本Gibson and Golden Gate Assembly实验:不同反应体积的成本效益和组装效率比较产品信息“仅用于科研,不用于临床诊断”
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2022-11-07 15:01:09naica®微滴芯片数字PCR系统助力微生物菌株分群
导读反刍动物是指具有反刍习性的一类哺乳动物,如牛、羊、长颈鹿、兔子等。反刍动物采食一般比较匆忙,大部分未经充分咀嚼就吞咽进入瘤胃,经过瘤胃浸泡和软化一段时间后,食物经逆呕重新回到口腔,经过再咀嚼混入唾液并再吞咽进入瘤胃,这种行为称为反刍行为。反刍动物的食物种类比其他种类的动物更丰富,结构组成也更复杂,但草料中的粗纤维含量较高导致其难以消化,反刍动物依赖于胃部微生物群的代谢能力来消化各种物质,但其转化效率低也是养殖业广泛关注的问题。虽然已有研究证明瘤胃中不同微生物的活性可以调节宿主利用植物生物能量的能力,但定植于宿主瘤胃中的微生物却很少受到关注。奥地利维也纳兽医大学的Cameron等人在Research Square在线发表了题为《Differential partitioning of key carbon substrates at the rumen wall by recently diverged Campylobacteraceae populations》的研究论文。文章采用多重数字PCR(dPCR)量化同一菌科的两种菌群,分析反刍动物瘤胃上的定植菌群分布及生物进化动态,为今后畜牧业提高动物代谢能力的研究提供了新思路。应用亮点:▶  宏基因组测序发现瘤胃上皮细胞中弯曲杆菌科两个种群的基因序列高度相似,利用naica®微滴芯片数字PCR系统可以对两个种群进行精准量化。▶ 使用不同培养添加物后,可以利用naica®微滴芯片数字PCR系统进行微生物种群分布跟踪。研究成果:作者通过对瘤胃上皮微生物组的16S rRNA扩增子分析发现了一个优势菌株(OTU)为弯曲杆菌科(Campylobacteraceae),并通过宏基因组测序发现该OTU两个主要种群Ca. C. stinkeris与Ca. C. noahi的基因含量高度相似,但pgl(蛋白质糖基化)操纵子不同。为了探究Ca. C. stinkeris与Ca. C. noahi两个种群空间分布的差异,作者通过naica®微滴芯片数字PCR系统比较了这两个种群在不同动物瘤胃乳突离上皮壁最近和最远两个位置的含量。结果发现不同动物的两个种群在这两个位置的比例接近。▲图1 Ca. C. stinkeris 和Ca. C. noahi在动物瘤胃乳突顶端和隐窝的含量比例。A)从乳突切片两个位置提取DNA使用dPCR进行定量分析。B) Ca. C. stinkeris 和Ca. C. noahi在动物瘤胃乳突两个位置的含量比例。横坐标为取样动物的名字。然后作者使用naica®微滴芯片数字PCR系统对两种菌群进行生长和适应性测定,数据显示Ca. C. stinkeris可以在以醋酸盐为主要碳源时积累的生物量,更好地生长,但被丙酸盐抑制,而Ca. C. noahiz在任何一种添加物存在的情况下在都没有检测到生长优势。因此,作者推断可能存在一些其他机制来最小化竞争,这种机制通过某些代谢生态位维度上的分化,防止它们生长动力学的重叠来支持两个种群的共存。▲图2 醋酸盐利用和丙酸盐抗性检测。A)通过种群特异性dPCR,评估添加5 mM醋酸盐(acetate)或丙酸盐(propionate)对生物量积累的影响。分别用单个菌株(左,单一培养)和竞争菌株(右,共培养)进行了实验。通过数字PCR这种定量技术,作者发现在瘤胃乳突的顶端和隐窝都分布有这两种优势菌群,且与上皮细胞分布数目无显著的相关性。另外,这两种菌群能够促进相关脂肪酸的代谢,进而发挥促进食物消化的功能。该文章为通过调节反刍动物体内某些盐离子浓度来调节优势菌群的分布比例进而提升消化能力提供了思路。
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2023-05-26 09:35:19基因的阴暗面你了解吗
    生命系统的进化从未停止,新事物的出现总是会伴随着旧事物的退出,甚至是消亡,基因正是如此。而任何事物都具有双面性,基因的进化也无法免于俗套。近期,来自麦克马斯特大学、芝加哥大学、巴斯德研究所等的研究人员通过对曾经保护人类免于黑死病的基因进行研究,发现这些基因如今跟克罗恩病、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的易感性增加有关。也就是说,基因的进化并不总是朝着有利的一面,其具有双面性。    传染病是推动人类进化***强大的选择压力之一,包括历史上有记录以来的一次***大死亡事件——第二次瘟疫大流行的爆发,通常称为黑死病,其由鼠疫耶尔森菌引起。这场瘟疫对非洲-亚欧大陆甚至产生了毁灭性的影响,造成多达30-50%的人口死亡,尽管已经过去几个世纪,但其影响似乎至今仍然在蔓延。    黑死病在人类遗传学上留下了持久的印记,改变了塑造我们免疫系统的频率,对于现在的人类来说或许不是一件好事。    为了确定可能在黑死病期间保护人类免于感染及死亡的基因,来自麦克迈斯特大学、芝加哥大学、巴斯德研究所的研究人员对来自黑死病出现之前、黑死病发展期间、黑死病发生之后两个不同欧洲人群的206个古代DNA提取物的免疫相关基因进行了遗传变异的特征。通过一系列研究,他们发现保护性变体与如今自身免疫性疾病易感性增加有关的等位基因重叠,为黑死病在塑造如今的疾病易感性方面所起的作用提供了经验性证据。相关研究成果以“Evolution of immune genes is associated with the Black Death”为题,发表在Nature上。    这项进行了长达七年的研究获取了从伦敦、丹麦出土的三组不同骨骼遗骸中提取的DNA,包括黑死病受害者、黑死病发生之前死亡的人、瘟疫发生后10到100年死亡的人,***终研究人员筛选出516个DNA样本。为了检测可能对鼠疫杆菌具有保护作用或易感性的等位基因,研究人员在候选区域(免疫基因和GWAS基因座)内搜索了在黑死病发生前后DNA样本之间等位基因频率出现极大变化的变体。相对于一组非免疫基因座,高分化位点的免疫基因座强烈富集,暗示了免疫基因的正向选择。      终研究人员锁定了四个基因,这些基因会在病原体入侵人类免疫系统时提供保护,并且发现这些基因中有的等位基因具有保护性有的则使人易感。研究人员所确定的***强关联是rs2549794和ERAP2表达之间的关联,其中保护性等位基因与ERAP2的表达增加5倍有关。***终通过实验发现,ERAP2与***鼠疫杆菌感染的能力之间存在关联性,表明ERAP2与鼠疫菌感染的反应有关,进而支持了黑死病期间ERAP2等位基因频率的变化可能是鼠疫菌诱导的自然选择所致这一观点。      如果一个人携带两个保护性ERAP2等位基因,则其在黑死病发生期间存活下来的可能性将增加40%-50%。因为拥有两份ERAP2基因拷贝的人,其免疫系统能产生更多功能性蛋白质,进而拥有强于拥有一份ERAP2基因的人的识别感染的能力。      但凡事皆有双面性,研究人员发现,鼠疫菌对ERAP2的选择可能会影响对其他病原体或疾病的免疫反应。选择有利的ERAP2变体是如今克罗恩病的风险因素,同时,拥有rs11571319遗传变体的基因CTLA4与类风湿性关节炎、红斑狼疮的风险增加有关。       综上,通过对黑死病受害者和幸存者数百年前的DNA进行分析,确定了帮助人们在瘟疫中幸存下来的关键基因差异。而这些差异继续塑造了今天的人类免疫系统,曾经保护人类免于黑死病的基因如今与更易换上克罗恩病和类风湿性关节炎等自身免疫性疾病有关。基因进化的双面性:成也萧何,败也萧何!       以上研究分析了黑死病发生期间对基因产生了一定影响,而这影响至今仍有所体现,说明基因的选择性进化具有双面性。      无独有偶,一项发表在Nature Reviews Genetics上,题为“The transition to modernity and chronic disease: mismatch and natural selection”的研究表明,现代化带来了一个完全有别于过去的环境,与以往环境具有更高适配性的基因,在现代生活中未必也是如此,甚至可能会使人更易患病,比如阿尔茨海默症、癌症以及心血管疾病。      在现代化进程中,人类进化的能力与快速变化的环境之间出现了不匹配,对人类健康产生了很大影响。由拮抗多效性(指的是能同时具有有利和不利影响的基因)介导的先前进化的遗传效应现在可能占非传染性疾病负担的很大部分,目前这些疾病造成了世界上超过63%的死亡。       威廉姆斯提出,衰老是由许多基因的综合作用引起的,这些基因具有多效性,也就是说其在年轻时带来好处但在年长时会付出代价。已经有几项研究提供了直接及间接证据,表明与老年疾病风险增加相关的基因与青少年存活率、生育能力及繁殖成功率增加有关。       RNA提取磁珠属于纳米生物磁珠的一种,主要作用是用于核酸提取过程中的RNA提取,粒径分布在500nm左右,是洛阳吉恩特生物自主研发生产的高分子纳米磁性微球,该磁珠悬浮时间长,磁响应时间迅速,对DNA甲基化过程中的提取环节提供良好的支持,可明显缩短实验时间,提高实验效率,并在提取结果上保持稳定,配合核酸提取仪,更能实现快速的RNA提取。
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