这篇充满 "求生欲" 的指南
将带你从死亡迷雾中杀出重围
还附赠培养界的 "黑科技" 神器
记得看到最后哦！
细胞的 "两种死法"
细胞死亡可不是 "随机事件"，不同 "死法" 背后藏着不同的 "真凶"，学会辨别才能精准施救！
被动死亡：被环境 "坑死" 的可怜鬼
死亡现场：细胞像吹爆的气球般肿胀破裂，内容物撒得满 "瓶" 都是 —— 这是典型的被动死亡。
图 1：细胞坏死：被动、意外死亡，细胞结构完全崩解，内部有害物质泄露，引发强烈的炎症反应，影响一大群细胞或组织区域。
致命环境：
▲ 营养沙漠：培养基里的葡萄糖、氨基酸被 "干饭细胞" 一扫而空，饿到 "解体"；
▲ 毒素围城：细胞代谢产生的乳酸、氨堆积成 "毒池"，活活把自己 "腌" 死；
▲ 操作翻车：偷懒没及时传代，细胞挤到 "窒息"，或是灭菌不彻底引入 "外敌"。
程序性死亡：被压力 "逼死" 的优等生
死亡现场：细胞突然 "瘦身" 收缩，染色质缩成小团，还冒出一堆 "凋亡小体"—— 这是有预谋的程序性死亡。
图 2：细胞凋亡：主动的、程序化的生理性或病理性死亡，由特定基因调控，细胞膜皱缩，形成凋亡小体，通常是单个细胞或小范围细胞发生。
压力来源：
▲ 环境暴击：CO? 浓度忽高忽低，pH 值像坐过山车，溶解氧突然 "断供"；
▲ 物理攻击：摇床转速太快，细胞被搅拌产生的 "水流暴击" 打成 "细胞泥"；
▲ 基因魔咒：细胞自己开启 "自杀程序"，或是被实验药物 "诱导赴死"。
把细胞从 "鬼门关" 拉回来
密度管理：给细胞开 "生存空间管理课"
黄金铁律：哺乳动物细胞密度必须控制在 0.5-2×10? cells/mL！
图 3：40 倍显微镜下，亚甲蓝染色红细胞计数的特写
操作口诀：
▲ "勤传代"：细胞密度一接近上限，立刻 "分家"（传代），别让它们 "叠罗汉"；
▲ "住新房"：密度太高就分瓶，让每个细胞都有自己的 "单人床"，远离代谢废物 "毒气"。
设备校准：给培养环境装 "精准导航"
强迫症级要求：
▲ CO? 浓度：误差必须＜0.2%，不然培养基 pH 值会像脱缰野马；
▲ 温度控制：±0.1°C 的精度，细胞怕热也怕冷，堪比 "温室里的花朵"；
▲ 摇床检查：摇晃要均匀，别让细胞在 "漩涡中心" 被活活甩伤。
图 4：定期维护培养设备：每年请专业人员给设备，特别是温度与 CO? 传感器 "体检"（校准）。
冻存升级：给细胞 "冬眠" 配 "豪华睡袋"
避坑警告：反复冻融 = 对细胞 "凌迟处死"！
冻存秘籍：
▲ 降温速度：用程序降温仪，以 1°C/min 的速度慢慢 "哄睡" 细胞，避免冰晶 "扎伤"；
▲ 冻存液配方：选无血清冻存液（含 DMSO 和海藻糖），像给细胞盖 "防冻被"，复苏存活率更高；
▲ 新细胞隔离：新细胞先 "隔离观察" 两周，确认没带 "病毒奸细"（污染）再正式 "入库"。
图 5： Eppendorf新款SmartBlock? Cryo thaw 细胞解冻加热模块，点击图片，解锁正确的细胞解冻方法！（内容回顾 ??细胞培养结果重复性差？正本溯源，解锁正确的细胞解冻方法！ ）
让细胞从 "活下来" 到 "住豪宅"
动态监测：给培养过程装 "智能天眼"
高科技神器：在线溶氧 /pH 探头 + 数据管理系统
图 6：底部集成有光学溶氧和 pH 传感器的摇瓶装载于摇床板上，在线监测培养过程参数（图片来源于网络）
▲ 实时监控：
?溶解氧低了？赶紧调快摇床转速，给细胞 "通氧气"；
?pH 值降了？马上加碳酸氢盐缓冲液，别让细胞 "酸中毒"；
耗材革命：抛弃 "有毒房东"，搬进 "安全公寓"
图 7：一次性摇瓶（锥形瓶或培养瓶）可节省准备时间并避免污染风险，是细胞悬浮培养、培养基配制、混合及储存的理想选择
踩坑经历：传统聚碳酸酯（PC）摇瓶会释放双酚 A，把 CHO-S 细胞 "毒" 得长不大！
换房指南：换成聚对苯二甲酸乙二醇酯共聚物（PETG） 摇瓶，这种 "环保型公寓" 没毒素，尤其适合 "敏感肌" 细胞（如 HEK293）。
参数优化：从 "新手村" 到 "高难度副本"
新手入门配置：
▲ 装液量：250 mL摇瓶装液容积控制在 20%，即 50 mL 空间，让细胞 "呼吸顺畅"；
▲ 转速推荐：120rpm，既能混匀又不伤害细胞，堪称 "黄金转速"；
▲ 从小做起：先在 50-100mL 规模练手，熟练了再挑战大规模培养。
进阶玩家操作：用响应面法（RSM）玩 "参数连连看"，找出温度、CO?、转速的最佳组合，让细胞又快又多地生产蛋白！
想让悬浮细胞培养少踩坑？试试这款 "开挂" 设备 ——Eppendorf CellXpert CS220 CO? 培养摇床
?? 清除污染担当：180°C 干热灭菌，2 小时消灭所有污染物，包括内毒素和热原；
?? 数据管理高手：可在线直接查看记录数据/事件项目，结合趋势图，全面控制和快速分析培养过程
??? 空间管理大师：可三台叠放，125-5000mL 摇瓶、锥底管及微孔板任意切换，装载量提升 40%。
点击上方图片解锁 >> Eppendorf CellXpert CS220 CO? 培养摇床，让悬浮细胞在 "洁净 + 稳定" 的培养环境中无忧成长！
往
期
回
顾
细胞培养避坑指南：细胞“生病”了？警惕这4个污染原因！
细胞培养避坑指南：从生长异常到结团危机，如何破解「培养玄学」？
全部评论(0条)
相关产品推荐（★较多用户关注☆）
Eppendorf Multipette M4 手动连续分液器
报价：面议 已咨询 7262次
Eppendorf Mastercycler nexus X2 PCR仪
报价：面议 已咨询 5803次
Eppendorf Reference2 单道多道移液器
报价：面议 已咨询 6497次
Eppendorf 5427 R台式高速冷冻离心机
报价：面议 已咨询 6246次
Eppendorf 多道移液器 8道 12道 16道 24道
报价：面议 已咨询 6145次
Top Buret 数字滴定仪
报价：面议 已咨询 5354次
Eppendorf Varispenser®/plus瓶口分液器
报价：面议 已咨询 5123次
Eppendorf 5430/R 小型台式高速冷冻离心机
报价：面议 已咨询 5810次
你可能还想看
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
在线留言
热点文章
近期话题
相关产品
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论