【应用案例】酪氨酸蛋白磷酸酶对植物盐胁迫响应的负调控

高盐度是影响植物生长发育的主要环境压力（干旱、盐度、高温）之一。在对高盐度的响应中，植物会同时经历渗透胁迫和离子胁迫，表现为Ca2+和活性氧（ROS）的快速积累，以及蛋白质磷酸化。

蛋白质磷酸化，尤其是丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸的磷酸化，在植物生长和发育过程中的信号传导，以及植物对生物或非生物胁迫响应中起着重要作用。

河北师范大学孙玉课题组在植物学期刊《Plant, Cell & Environment》上发表了题为“AtPFA-DSP3, an atypical dual-specificity protein tyrosine phosphatase, affects salt stress response by modulating MPK3 and MPK6 activity”的研究论文。该课题组以模式植物拟南芥为对象，研究了一种非典型的双特异性酪氨酸蛋白磷酸酶——AtPFA-DSP3 (DSP3)与蛋白激酶MPK3/MPK6的互作，以及对拟南芥盐胁迫响应的影响。

研究发现，DSP3可以与蛋白激酶MPK3/MPK6发生互作并使其去磷酸化。在高盐度条件下，DSP3功能丧失突变体对盐响应的敏感性降低，表现为种子萌发率、存活率和叶绿素含量升高（相较于野生型）；相反，突变体的离子渗透率和ROS含量则降低（相较于野生型）。以上说明在拟南芥盐胁迫响应过程中，DSP3起负调控作用。

其中，DSP3与MPK3/MPK6的互作通过荧光素酶（Luciferase）在本氏烟草中的表达得到了验证，生物发光成像在VILBER多功能活体成像系统Fusion FX7上完成。

VILBER Fusion FX7多功能成像系统

产品特点：

· 采用新一代深度制冷的CCD相机，暗电流0.0001e/p/s@-90℃, 制冷速度更快且寿命更长；

· F0.7超级镜头，大大提高了单位时间内的进光量，从而有效缩短曝光时间，尤其适用于Luc报告基因检测的生物发光成像；

· 荧光成像采用脉冲LED光源，7通道，激发强度比卤素灯更高。基于扫描方式，激发均一性≥99%；

· 全自动控制7位发射滤光片轮，搭载6个专用窄波滤光片，涵盖400~900nm，满足多种染料的检测需求

应用范围：

· 小动物成像：基于生物发光或荧光的肿瘤发育、药物代谢、细胞迁移追踪、纳米材料研究等；

· 植物成像：LUC 或GFP、RFP等报告基因检测，转基因鉴定、基因互作、微生物侵染、植物发育、植物生物节律等；

· 化学发光 & 荧光Western blot，Northern blot或Southern blot；

· 免染胶，银染&考染蛋白胶，SSCP胶，培养皿（细胞或菌落），微孔板，蛋白芯片或其他基于荧光或化学发光的样品。