人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒说明书
- 上传人: 上海科学仪器有限公司 |大小:41.5KB|浏览:193次|时间:2018-09-13
- 文档简介
- 您可能感兴趣的资料
-
上海炎熙生物为您提供支原体清除剂,帮您去除细胞培养中的支原体污染。采用双重杀菌机制,不易产生耐药。可同时去除
-
CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高
-
支原体PCR检测试剂盒 灵敏度高 使用方便 涵盖所有支原体种类,能在2-3小时内获得可靠的结果。特点:①特异
-
湿膜规使用说明书
-
说明书
-
Cobalt RapID空间位移拉曼-空间位移拉曼技术的原材料快速鉴别 (技术说明书)
-
电位滴定仪TIM8XX系列中英文对照说明书
-
Tecan核酸提取与纯化套餐又添新成员,老牌试剂盒Macherey
-
上海田枫冷水机使用说明书
-
YHA-2310型便携式溶解氧测定仪说明书
人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人ANGPTL3单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的ANGPTL3与单抗结合,加入生物素化的抗人ANGPTL3,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,ANGPTL3浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中ANGPTL3浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):4ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液至少作1:50稀释(取20ul,加标本稀释液980ul,稀释50倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.2ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入20ng/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应ANGPTL3含量,再乘上稀释倍数50即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的ANGPTL3检测浓度小于0.1ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人ANGPTL3。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
标签: