人(human)骨碱性磷酸酶(BAP) 试剂盒说明书
- 上传人: 研域(上海)化学试剂有限公司 |大小:9.33KB|浏览:378次|时间:2018-09-14
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人(human)骨碱性磷酸酶(BAP)试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用标本:血清或者血浆试剂组成精密度微孔板96孔(MicrotitrationStrips)1块2~8℃干燥保存酶标偶合液(Conjugate)1瓶12.0毫升2~8℃冷藏保存标准品(Standard)5瓶各1.0毫升2~8℃冷藏保存呈色剂A(SubstrateA)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存呈色剂B(SubstrateB)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存终止液(StoppingSolution)1瓶6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液(RinsingBufferx20)1瓶60.0毫升2~8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液(Diluentx5)1瓶15.0ml2~8℃冷藏保存英文说明书,中文说明书各一份室温保存二、ELISA试剂盒注意事项1.此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低极ng确度,造成吸光度偏离的假像。加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。三、实验前准备1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3.浓缩洗液与医用蒸馏水119倍稀释后成为应用洗涤液4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水14倍稀释成应用样品稀释液5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)四、操作步骤1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板置于37℃温育30分钟;4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。8、将96孔板置于37℃温育30分钟。9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。12、在每个孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样)13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。15、在酶标仪上,450nm处测定OD;显色后,15分钟内进行测定。16、根据制备的标准曲线,计算样本含量五、ELISA试剂盒结果判断1.仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;2、检测值范围:01200U/L3、敏感度:1.0U/L
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