硫酸多粘菌素酶联免疫分析

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硫酸多粘菌素酶联免疫分析试剂盒使用说明书1工作液准备1.1硫酸多粘菌素标准品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb1.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20（1+19）稀释备用1.3样本稀释液：用蒸馏水按1:10（1+9）稀释备用1.3显色剂：已备用，避免光线直照1.4反应终止液：已备用2样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）2.1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液2.2QL振荡3分钟2.3用WhatmanNo1滤纸过滤2.4取100μl处理后的样品，加入400μl样本稀释液2.5取25μl处理后的样品，加入25μl样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2）3酶免分析步骤3.1实验须知3.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（252℃），时间约2小时。回温室温（252℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的极ng确度和准确度。3.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存3.1.3请不要改变分析程序3.1.4请使用极ng确的微量移液器3.1.5操作一旦开始，请不要中断任何程序3.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作3.1.7为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样3.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面3.2分析步骤3.2.1预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测3.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存3.2.3样品稀释液（10）、浓缩洗涤液（20）稀释成工作液（蒸馏水或去离子水稀释）3.2.4在B0孔中加入50μl0.0ng/ml标准品溶液3.2.5在各标准孔中加入50μl的标准品溶液3.2.6在各样品孔中加入50μl样品溶液3.2.7在所有孔中加入50μl的抗硫酸多粘菌素抗体酶结合物3.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。3.337℃温浴30min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）3.3.1甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。3.4反应3.4.1洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50μl显色液A，再加50μ显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀3.4.237℃温浴10min3.4.3每孔中加入50μl终止液，混匀3.4.4在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。
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