Fluoro AChE检测试剂盒

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货号品名规格2017年价格AChE100-2FluoroAChE-100tests100Tests7225产品描述：保存温度：2-8度主要优点：无需放射性物质。应用-流式细胞仪或荧光显微镜。检测细胞水平的细胞溶解活性。适用于多种类型的哺乳动物细胞系。技术测量CMC/ADCCZ常用的方法是放射性铬-51（51Cr）释放试验（2）。该测定有几个缺点：昂贵的，难以加载某些细胞类型，由于严格的环境规定而处置昂贵，并且具有51Cr自发释放的高背景。使用流式细胞仪，现在可以消除对放射性物质的需要，并增加在单个细胞基底上定量细胞溶解活性的能力。各组已经证明通过流式细胞术测量CMC/ADCC活性与传统的51Cr释放测定（3,4,5,6）具有强烈（95％）的相关性。测定原理细胞跟踪染料CFSE（7,8,9）用于标记靶细胞群体。在测定完成实验方案后，加入7AAD（活/死）（10,11）以测量细胞死亡。7AAD仅进入膜受损细胞并与DNA结合。流式细胞术用于门靶细胞并测量7AAD阴性对7AAD后细胞。％细胞毒性通过以下等式计算（参见下面的实验例）：7AAD正（右上象限）=R1/7AADPostitve（右上象限）=R1+7AAD负（右下象限）=R2×100ACT1为了测试猪gd淋巴细胞的自然杀伤能力，将K562细胞染色并调整至含有10％FBS的1×104个细胞/100μlPRMI的终浓度。以25:1,50:1和100:1的E/T比加入gd淋巴细胞，调节至400μlRPMI的总体积，然后在37℃，无菌封盖的面管中孵育4小时。孵育后，将活/死染色剂直接加入每个管中，在冰上孵育15分钟并通过流式细胞术分析。引用文献a.Perussia,B.,(1998).CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology230,p63.b.Whiteside,T.L.,Rinaldo,C.R.andHerberman,R.B.(1992)CytolyticCellfunctions.In:N.R.Rose,E.C.deMacario(Eds.),ManualofClinicalLaboratoryImmunology.AmericanSocietyforMicrobiology.Washington,DC,p.220.Brunner,K.T.,Manuel,J.,Cerotini,J.C.,Chapuis,B.,(1968).QuantitativeAssayoftheLyticActionofImmuneLymphoidCellsonCr-labelledAllogenicTargetCellsin-vitro;InhibitionbyIso-antibodyandbyDrugs,Immunology14,181.Lee-MacAry,A.E.,Ross,E.L,Davies,D.,andWilkinson,R.W.,(2001).DevelopmentofaNovelFlowCytometricCell-mediatedCytotoxcityAssayUsingtheFluorophoresPKH-26andTO-PRO-3Iodide.J.Immunology.Met252,83-92.Gogoy-Ramirez,K.,Franck,K.,andGains,H.,(2000).ANovelMethodfortheSimultaneousAssessmentofNaturalKillerCellConjugateFormationandCytotoxicityattheSingle-cellLevelbyMulti-parameterFlowCytometry.JournalofImmunology.Met239,35-44.Goldberg,J.E.,Sherwood,S.W.,Clayberger,C.,(1999).ANovelMethodforMeasuringCTLandNKCell-mediatedCytotoxicityUsingAnnexinVandTwo-colorFlowCytometry.JournalofImmunology.Methods224,1.Hatam,L,.Schuval,S.,Bonagura,V.R.,(1994).FlowCytometricAnalysisofNaturalKillerCellFunctionasaClinicalAssay.Cytometry16,59.L.SDeClercketal.,J.Immunol.Meth.172,115(1994).M.Bronner-Fraser,J.CellBiol.101,610(1985).Rabinovitch,P.S.,etal.,J.Immunol.136,2769(1986).Su,X.,J.Immunol.156,156,4198(1996).Olin,MR.Lee,J.Choi,K,andMolitor,Tw.gdT-lymphocyteCytotoxicActivityagainstMycobateriumbovisAnalysedbyFlowCytometry:JournalofImmunologicalMethods;Publicationinprocess.Olin,MR.Thesis,K.Cho,J.andMolitor,T.W.MorphineSuppressesMicroglialDirectedCytolyticActivitybygdLymphocytes.JournalofNeuroimmunology;Publicationinprocess.
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