D3100L4053-CCK-8说明书
- 上传人: 上海起发实验试剂有限公司 |大小:41.4KB|浏览:641次|时间:2018-09-29
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订购信息:产品名称货号规格保存价格(元)活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒D3100L40531ml4℃245活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒D3100L40545ml4℃595活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒D3100L405510ml4℃1050活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒D3100L405630ml4℃2080活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒D3100L4057100ml4℃5850产品描述CellCountingKit-8(CCK-8)细胞增殖与活性检测试剂盒是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲(formazan,参考图1)。WST-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。图1:WST-8分子结构及检测原理运输与保存方法冰袋运输。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放数年,反复冻融会造成测定背景O.D值升高,如经常使用,建议存放于4℃即可。操作方法1.在96孔板中配制100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5%CO2的条件下)。2.向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。如果测定细胞活性,则不需要2-3步骤,直接从第四步操作。3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6,12,24或48小时)。4.向每孔加入10μLCCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。5.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。注意事项1)CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化反应,如果待检测体系中有较多还原剂(或抗氧化剂)会造成背景O.D值升高,干扰检测结果。如果实验中有还原剂,请检查背景的O.D值,即测定、比较空白培养基加入药物与不加药物的培养基(含细胞)在加入CCK-8试剂后的O.D值,如果空白O.D值明显偏高,则说明有反应,应设法去除或折算干扰因素。2)如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。细胞培养基酚红不影响测定结果。3)为使CCK-8试剂盒培养基充分混匀,减少CCK-8在移液器上的残留,建议加样前用培养基稀释CCK-8试剂,混匀后加样。4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。CCK-8与同类试剂比较检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK法产品性状粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用现配现用即开即用即开即用检测灵敏度高很高很高高检测时间较长较短较短Z短检测波长560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm细胞毒性高,细胞形态完全消失很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变试剂稳定性一般较差一般很好批量样品检测可以非常适合非常适合非常适合便捷程度一般便捷便捷非常便捷
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