仪器网

欢迎您: 免费注册 仪器双拼网址:www.yiqi.com
首页-资讯-资料-产品-求购-招标-品牌-展会-行业应用-社区-供应商手机版
官方微信
中国仪器网资料中心
仪器网/ 技术资料/ 产品资料/ 实验室常用设备/混合/分散设备/搅拌器/磁力搅拌器/ 大鼠生长因子ELISA试剂盒说明书

大鼠生长因子ELISA试剂盒说明书

上传人: 上海恒远ELISA试剂盒供应商 |大小:88.5KB|浏览:248次|时间:2018-11-16
大鼠生长因子ELISA试剂盒说明书
文档简介

上海恒远生物科技有限公司专业供应大鼠生长因子ELISA试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量1**%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换。若需要了解试剂盒的详细信息,请来的咨询:电话:021-6052034813636351217业务QQ:1293468407何经理大鼠生长因子ELISA试剂盒本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T0pg/ml-160pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中生长因子含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠生长因子水平。用纯化的大鼠生长因子抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入生长因子,再与HRP标记的生长因子抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的生长因子呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠生长因子浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160pg/ml)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。3.血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。4.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。6.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。7.培养细胞检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。8.组织标本切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.80pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4opg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液3.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。4.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。5.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。7.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。8.温育:操作同3。9.洗涤:操作同5。10.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.11.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。12.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与大鼠其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。4.局限性:6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月
标签:

您可能感兴趣的资料
立即上传
该会员其他文档
相关其他文档
看过此文档还看过
X您尚未登录
账号登录
X您尚未登录
手机动态密码登录
X您尚未登录
扫码登录
在线留言
官方微信

仪器网微信服务号

扫码获取最新信息


仪器网官方订阅号

扫码获取最新信息

在线客服

咨询客服

在线客服
工作日:  9:00-18:00
联系客服 企业专属客服
电话客服:  400-822-6768
工作日:  9:00-18:00
订阅商机

仪采招微信公众号

采购信息一键获取海量商机轻松掌控