冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂盒

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冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂盒产品说明书主要用途冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学脱蜡方法和伟郝夫（Verhoeff）苏木素以及三色染料（trichrome），分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景弹性纤维（elasticfiber），又称为黄色纤维（yellowfiber），是固有结缔组织（Connectivetissueproper）细胞外基质的成分之一，由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质（elastin）、原纤维蛋白（fibrillin；FBN）等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带（periodontalligament）、脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症（cutislaxa）、威廉姆斯综合征（WilliamsSyndrome）等疾病。基于摩罗利（mallory）首次应用三色系统的方法，马森（masson）进行了改良，在三色复合染料体系中，使用苯胺篮（anilineblue）替代绿篮。同时使用伟郝夫（Verhoeff）苏木素选择性染色弹性纤维，三色复合染料帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白（fibrin）等组织成分。马森方法操作复杂，可以细致区分多种组织成分。产品内容清理液（ReagentA）200毫升固着液（ReagentB）10毫升韦格液（ReagentC）100毫升祛色液（ReagentD）20毫升岑克液（ReagentE）100毫升范氏液（ReagentF）10毫升比氏液（ReagentG）10毫升酸性液（ReagentH）10毫升染色液（ReagentI）10毫升修正液（ReagentJ）10毫升脱水液A（ReagentK）10毫升脱水液B（ReagentL）10毫升透明液（ReagentM）10毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证6月用户自备小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器培养箱或烘箱：用于样品反应孵育微波炉：用于样品反应孵育处理中性树脂：用于切片封片光学显微镜：用于切片染色后观察分析实验步骤一、样品固着处理1．准备好5微米厚的冰冻切片2．小心加上200微升清理液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面3．室温下孵育2分钟4．小心移去切片上的清理液（ReagentA）5．小心加上200微升固着液（ReagentB）在切片上，铺满整个切片样品表面6．室温下孵育5分钟7．小心移去切片上的固着液（ReagentB）8．小心加上200微升清理液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面9．室温下孵育2分钟10．小心移去切片上的清理液（ReagentA）二、样本染色处理操作一：标准染色1．小心加入1毫升韦格液（ReagentC）在切片上，铺满整个切片样品表面2．放进60℃恒温培养箱孵育60分钟3．小心移去韦格液（ReagentC）4．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟5．小心移去切片上的清理液（ReagentA）6．小心加入200微升祛色液（ReagentD）在切片上，铺满整个切片样品表面7．室温下孵育5分钟8．小心移去祛色液（ReagentD）9．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟10．小心移去切片上的清理液（ReagentA）11．小心加入1毫升岑克液（ReagentE）在切片上，铺满整个切片样品表面12．放进60℃恒温培养箱孵育60分钟13．小心移去岑克液（ReagentE）14．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟15．小心移去切片上的清理液（ReagentA）16．小心加入200微升范氏液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面17．室温下孵育30分钟18．小心移去范氏液（ReagentF）19．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟20．小心移去切片上的清理液（ReagentA）21．小心加入200微升祛色液（ReagentD）在切片上，铺满整个切片样品表面22．室温下孵育5分钟23．小心移去祛色液（ReagentD）24．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟25．小心移去切片上的清理液（ReagentA）26．小心加入200微升比氏液（ReagentG）在切片上，铺满整个切片样品表面27．室温下孵育5分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）28．小心移去比氏液（ReagentG）29．小心加入200微升清理液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面30．小心移去切片上的清理液（ReagentA）31．重复实验步骤29至30二次32．小心加入200微升酸性液（ReagentH）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以孵育15分钟，增强染色效果）33．小心移去切片上的酸性液（ReagentH）34．小心加上200微升染色液（ReagentI）在切片上，铺满整个切片样品表面35．室温下孵育5分钟，避免光照（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）36．小心移去切片上的染色液（ReagentI）37．小心加上200微升修正液（ReagentJ）在切片上，铺满整个切片样品表面38．室温下孵育2分钟39．小心移去切片上的修正液（ReagentJ）40．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟41．小心移去切片上的清理液（ReagentA）42．（选择步骤）小心加上200微升脱水液A（ReagentK）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：如果比氏液（ReagentG）染色过深，建议使用由此步骤开始的选择步骤，并快速操作）43．（选择步骤）小心移去切片上的脱水液A（ReagentK）44．（选择步骤）小心加上200微升脱水液B（ReagentL）在切片上，铺满整个切片样品表面45．（选择步骤）小心移去切片上的脱水液B（ReagentL）46．（选择步骤）小心加上200微升透明液（ReagentM）在切片上，铺满整个切片样品表面47．（选择步骤）小心移去切片上的透明液（ReagentM）48．放上盖玻片或封片（中性树脂）49．即刻在一般光学显微镜下观察：弹性纤维――呈现黑色细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色角蛋白――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色操作二：热处理染色1．准备3个50毫升烧杯或小型染色缸，分别加入50毫升清理液（ReagentA）、韦格液（ReagentC）和岑克液（ReagentE）2．小心放进上述固着处理的切片到50毫升韦格液（ReagentC）小型染色缸里3．放进微波炉（600瓦）加热45秒4．小心移去切片上的韦格液（ReagentC）5．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟6．小心移去切片上的清理液（ReagentA）7．小心加入200微升祛色液（ReagentD）在切片上，铺满整个切片样品表面8．室温下孵育5分钟9．小心移去祛色液（ReagentD）10．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟11．小心移去切片上的清理液（ReagentA）12．小心将切片置入50毫升岑克液（ReagentE）小型染色缸里13．放进微波炉（600瓦）加热60秒14．小心移去岑克液（ReagentE）15．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟16．小心移去切片上的清理液（ReagentA）17．小心加入200微升范氏液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面18．室温下孵育30分钟19．小心移去范氏液（ReagentF）20．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟21．小心移去切片上的清理液（ReagentA）22．小心加入200微升祛色液（ReagentD）在切片上，铺满整个切片样品表面23．室温下孵育5分钟24．小心移去祛色液（ReagentD）25．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟26．小心移去切片上的清理液（ReagentA）27．小心加入200微升比氏液（ReagentG）在切片上，铺满整个切片样品表面28．室温下孵育5分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）29．小心移去比氏液（ReagentG）30．小心加入200微升清理液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面31．小心移去切片上的清理液（ReagentA）32．重复实验步骤30至31二次33．小心加入200微升酸性液（ReagentH）在切片上，铺满整个切片样品表面34．室温下孵育10分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）35．小心移去切片上的酸性液（ReagentH）36．小心加上200微升染色液（ReagentI）在切片上，铺满整个切片样品表面37．室温下孵育5分钟，避免光照（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）38．小心移去切片上的染色液（ReagentI）39．小心加上200微升修正液（ReagentJ）在切片上，铺满整个切片样品表面40．室温下孵育1分钟41．小心移去切片上的修正液（ReagentJ）42．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟43．小心移去切片上的清理液（ReagentA）44．（选择步骤）小心加上200微升脱水液A（ReagentK）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：如果比氏液（ReagentG）染色过深，建议使用由此步骤开始的选择步骤，并快速操作）45．（选择步骤）小心移去切片上的脱水液A（ReagentK）46．（选择步骤）小心加上200微升脱水液B（ReagentL）在切片上，铺满整个切片样品表面47．（选择步骤）小心移去切片上的脱水液B（ReagentL）48．（选择步骤）小心加上200微升透明液（ReagentM）在切片上，铺满整个切片样品表面49．（选择步骤）小心移去切片上的透明液（ReagentM）50．放上盖玻片或封片（中性树脂）51．即刻在一般光学显微镜下观察：弹性纤维――呈现黑色细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色角蛋白――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色注意事项1．本产品为50次操作2．操作时，须戴手套3．试剂具有腐蚀性，注意操作安全4．建议使用玻璃染色缸5．每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干6．试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面7．整个操作，在避光状态下进行8．染色完成后，即刻进行光学显微镜观察9．样品染色后保存，避免光照10．本公司提供系列特定组织染色试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定显色清晰
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