革兰氏阴性细菌外膜囊泡制备试剂盒产品说明书
- 上传人： 上海科学仪器有限公司 |大小：123.24KB|浏览：609次|时间：2018-11-18
-
- 文档简介
- 您可能感兴趣的资料
-
CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高
-
支原体PCR检测试剂盒 灵敏度高 使用方便 涵盖所有支原体种类，能在2-3小时内获得可靠的结果。特点：①特异
-
Tecan核酸提取与纯化套餐又添新成员，老牌试剂盒Macherey
-
美国Abraxis公司三聚氰胺检测试剂盒检测方法
-
-内酰胺酶检测试剂盒
-
鲤鱼卵黄蛋白原ELISA检测试剂盒
-
牛奶中抗生素残留检测试剂盒的研制及应用
-
小鼠糖皮质激素受体(GR-)elisa试剂盒使用说明书
-
大鼠丙二醛(MDA)elisa试剂盒说明书
-
人成骨生长肽(OGP)elisa试剂盒说明书
革兰氏阴性细菌外膜囊泡制备试剂盒产品说明书主要用途革兰氏阴性细菌外膜囊泡制备试剂是一种旨在使用差速离心，分离并收集所有细胞外膜囊泡的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种革兰氏阴性细菌外膜囊泡及其蛋白的纯化。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，萃取产量和纯度皆佳。技术背景外膜囊泡（outermembranevesicle；OMV）为含有周质内容物（包括外膜蛋白、DNA、RNA、脂多糖、脂质、周质蛋白、黏附素、免疫调节化合物等）的球形电子致密芽状体（sphericalbud），细胞外间隔体，双层磷脂，20至200纳米大小，来自于革兰氏阴性细菌周边突起物的释放形成或胞外分泌产物，使之与环境或宿主细胞进行反应，并调解各种功能，包括促进病理形成，调节细菌互动，转运各种信号分子（例如DNA、RNA、蛋白质、内毒素、毒力因子等），保护细菌生存、结合和侵入，引起毒性，产生抗生素抗性等。外膜囊泡的产量取决于细菌生长周期、营养条件、温度、氧化应激状态等。病原菌的外膜囊泡10倍于非病原菌体。外膜囊泡具有疫苗开发中免疫调节潜力。通过差速离心和蛋白酶YZ混合剂，获得高纯外膜囊泡，充分保留其蛋白质的免疫和生物学活性。产品内容保存液（ReagentA）毫升溶解液（ReagentB）毫升活性液（ReagentC）微升产品说明书1份保存方式保存活性液（ReagentC）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器1.5毫升离心管：用于样品保存的容器分光光度仪：用于测定细菌浓度台式离心机：用于样品操作超速离心机：用于样品操作恒温摇床：用于培养细菌细胞0.45微米滤膜：用于样品操作真空浓缩装置：用于样品操作实验步骤实验开始前，将试剂盒里的活性液（ReagentC）从－20℃的冰箱里取出，置入冰槽里冻融，然后移出xx毫升溶解液（ReagentB）到1.5毫升离心管，加入xx微升活性液（ReagentC），充分混匀，置于冰槽里，标记为溶解工作液。然后进行下列操作。准备好1毫升过夜培养的新鲜细菌样品移取500微升到50毫升细菌培养液（注意：用户可以进行诱导培养，例如无铁培养等）放进37℃恒温摇床孵育过夜，速度为200RPM在分光光度仪上测OD600为1（1OD＝1X109细胞/毫升；总量为5X1010细胞）转移到预冷的50毫升锥形离心管放进4℃台式离心机离心30分钟，速度为5000g小心移取上清液到新的50毫升锥形离心管重复实验步骤6和7一次使用0.45微米滤膜真空过滤一次（选择步骤）使用100kD蛋白临界点浓缩处理放进4℃超速离心机离心3小时，速度为150000g小心抽去上清液加入xx微升预冷的保存液（ReagentA）或加入xx微升预冷的含有溶解液（ReagentB）和活性液（ReagentC）的溶解工作液用枪头上下抽吸，充分混匀转移到到新的预冷的1.5毫升离心管即刻放进－70℃冰箱里保存或置于冰冰槽里备用进行后续蛋白定量、荧光定量或电镜检测等注意事项本产品为20次（50毫升菌液）操作所有操作须在4℃状态下进行建议使用新鲜细菌接种，培养到指数生长阶段为理想状态活性液（ReagentC）避免反复冻融本产品按照50毫升培养菌液配制。如果操作不同菌液容量，可相应调整试剂用量根据菌种不同，50毫升（OD600＝1）菌液可获得5至100微克外膜囊泡蛋白制备产物如果放在－70℃冰箱里储存备用，严格避免反复冻融本公司提供系列细菌试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定无蛋白酶污染
标签：
