细胞色素P450亚酶CYP2D6(AMMC)活性荧光定量检测
- 上传人: 上海科学仪器有限公司 |大小:42KB|浏览:859次|时间:2018-11-18
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主要用途细胞色素P450亚酶CYP2D6(AMMC)活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过AMMC去甲基化酶反应系统中AMMC转化为AMHC后荧光峰值的变化,即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品(动物、人体)或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶2D6的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶:CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物(xenobiotics),包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢,即单加氧化作用(monooxygenation)和羟化作用(hydroxylation)。AMMC羟基化酶(AMMC7-hydroxylase)的活性是细胞色素P450亚酶2D6的诊断标记,其基于AMMC羟基化酶选择性催化细胞色素P450亚酶2D6的活性。人体细胞色素P450亚酶2D6(CYP2D6;EC1.14.14.1),主要表达在肝、肾、胎盘、脑、乳腺、肺、和肠道组织中,是肝组织细胞色素P450酶总量的4%。CYP2D6是多态性酶,在80多个等位基因上,出现变异,具有个体和种族差异,与肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏症等疾病发生,以及药物代谢敏感性差异存在相关性。CYP2D6主要代谢三分之一的临床药物,尤其含有碱性氮原子(basicnitrogenatom)的药物,包括异喹胍(debrisoquine)的4-羟基化、鹰爪豆碱(sparteine)的氧化、抗抑郁症药物、神经松弛药(neuroleptic),以及内源性5-羟色胺(hydroxytryptamine)、神经类固醇(neurosteroid)等。同时会产生肝毒性的乙酰苯醌亚胺(N-acetyl-p-benzyquinoneimine)。基于选择性底物AMMC(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-methoxy-4-methylcoumarin)在CYP2D6的去甲基化(o-demethylation)作用下,转化为AMHC羟基香豆素(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-hydroxy-4-methylcoumarin)后荧光峰值的变化(激发波长405nm,散发波长460nm),来定量测定细胞色素P450酶2D6的活性。其反应系统为:
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