组织乙酰辅酶A羧化酶
- 上传人: 上海科学仪器有限公司 |大小:42.8KB|浏览:1010次|时间:2018-11-18
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主要用途组织乙酰辅酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过底物乙酰辅酶A和碳酸氢盐受到乙酰辅酶A羧化酶的催化反应后,进而由丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统,测定产生ADP过程中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反应,即采用光度法测定其氧化后峰值的变化,以分析组织裂解样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或完全纯化酶样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的定量检测,以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,高度敏感。技术背景乙酰辅酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又称为乙酰辅酶A碳酸氢盐连接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依赖性含生物素酶,参与脂肪酸生物合成。哺乳动物乙酰辅酶A羧化酶单体分子量为225-250Kd,含有许多磷酸化位点,以及1个生物素辅基位点、2个催化位点和1个异构(allosteric)位点。乙酰辅酶A羧化酶催化生物素辅基(prostheticgroup)的羧基化反应,然后将生物素上的羧基转移到辅酶A上,产生丙二酰辅酶A(malonylCoA),成为长链脂肪酸合成前的关键步骤。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)调节该酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ该酶的活性。基于底物乙酰辅酶A(acetylCoA)和碳酸氢盐,在ATP的存在下,受到乙酰辅酶A羧化酶的催化,获得产物丙二酰辅酶A和ADP,进而通过丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase;LDH)反应系统中,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的变化(340nm),来定量分析乙酰辅酶A羧化酶的活性。其反应方式为:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+
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