细胞琼脂克隆斑形成实验方法

收藏 评价 举报

• 分享

细胞琼脂克隆斑形成实验方法1.取MDA-435-OL-Sec23a-GFP和MDA-435-OLLV3NC-GFP对数生长期的细胞制成单细胞悬液,使用血细胞计数板计数后备用。2.使用梯度稀释法适当稀释细胞悬液后,向6孔板的每个孔内分别加入含50个细胞的2mL细胞悬液,细胞悬液使用含10%FBS的DMEM培养液配制。每种细胞均设置3个6孔板复孔。3.12h后镜下可观察到6孔板内细胞已经全部贴壁,此时将皿中培养液换成琼脂浓度为0.2%的含10%FBS的DMEM培养液,置于37°C培养箱内培养。4.10d后镜下可观察到6孔板内出现集落生长的细胞克隆斑。此时弃去含琼脂的培养液,用PBS轻轻润洗2次,然后6孔板内每孔加入2mL冰甲醇固定30min,固定结束后使用PBS轻轻润洗2次,然后使用结晶紫染色5min,再用PBS轻轻润洗后室温干燥。5.干燥完成后将6孔板移至显微镜下观察计数每个孔内细胞克隆斑数量,超过50个细胞的克隆斑即可计数。根据细胞克隆斑形成率=(克隆数/接种细胞数)×1**%来计算细胞体外克隆率。
标签：

• 作微波合成实验时，如何选择**条件

  作微波合成实验时，如何选择**条件

• 高校微波合成实验方法研究

  高校微波合成实验方法研究

• 实验室移液整体解决方案有机合成实验室(二)

  实验室移液整体解决方案有机合成实验室(二)

• 实验室移液整体解决方案有机合成实验室(一)

  实验室移液整体解决方案有机合成实验室(一)

• 血管生成实验步骤－实验方法完善版

  血管生成实验步骤－实验方法完善版

• RTCA技术与空斑形成实验对比

  RTCA技术与空斑形成实验对比

• 导热系数测量方法的选择

  在化工、建筑行业中，很多科研生产和应用过程都涉及到热量传递，导热系数(或热导率)常被用来衡量材料的导热性能和

• 饲料的微波消解处理方法

  我国饲料工业飞速发展，饲料总产量逐年递增，现已成为**饲料生产大国。随之而来的饲料品质和安全性等问题引起人们

• 尿液中儿茶酚胺和变肾上腺素的快速、同步分析方法

  通过对之前发表的方法进行扩展，本应用纪要介绍了尿液中单胺神经递质与儿茶酚胺的提取与分析方法。采用沃特世ACQ

• UPC2方法放大到SFC的策略：应用于制备色谱

  基于密度调整的放大策略可在不同的系统/色谱柱配置之间GX地进行方 法转移。实现SFC分析级应用的快速方法开发