大肠杆菌(E.coli)elisa试剂盒说明书
- 上传人: 上海心语生物科技有限公司 |大小:145.75KB|浏览:519次|时间:2019-01-02
- 文档简介
- 您可能感兴趣的资料
-
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒elisa试剂盒说明书
-
兔子白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒elisa试剂盒说明书
-
大鼠(Rat)超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒产品说明书本试剂仅供研究使用标本:组织匀浆试验原理
-
PA_应用案例_浊度在线检测在大肠杆菌发酵中的应用
-
利用压力循环技术(PCT)提高从大肠杆菌提取蛋白的产量
-
大肠杆菌质粒DNA的提取
-
发酵罐在大肠杆菌培养中的应用
-
北京市现场制售饮用水中大肠杆菌/大肠菌群快速检测方案
-
用光学传感器非侵入式实时监控大肠杆菌发酵过程中的氧
-
大肠菌群粪大肠菌群大肠杆菌的从属关系及介绍
大肠杆菌(E.coli)elisa试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中大肠杆菌(E.coli)表达。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌(E.coli)表达。用纯化的大肠杆菌(E.coli)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中大肠杆菌(E.coli)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的大肠杆菌(E.coli)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中大肠杆菌(E.coli)的存在与否。大肠杆菌(E.coli)elisa试剂盒组成:130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求:1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。大肠杆菌(E.coli)elisa试剂盒操作步骤:1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大肠杆菌(E.coli)elisa试剂盒计算和结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为大肠杆菌(E.coli)阴性阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为大肠杆菌(E.coli)阳性注意事项:1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须大肠杆菌(E.coli)elisa试剂盒注意安全。保存条件及有效期:1.试剂盒保存:2-8℃。2.有效期:6个月
标签: