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全血基因组DNA提取试剂盒说明书

上传人: 上海索宝生物科技有限公司 |大小:61.5KB|浏览:10019次|时间:2018-09-02
全血基因组DNA提取试剂盒说明书
文档简介

全血基因组DNA提取试剂盒说明书货号:D1800规格:50T/100T保存:室温(15℃-25℃)干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2红细胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脱液10ml20ml吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介:本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够GX、专一吸附DNA,可Zda限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤:使用前请先在漂洗液和溶液B中加入无水乙醇,加入休积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lml-1ml血液样品):a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液,充分颠倒混匀,12000rpm离心1min,小心吸去上清,沉淀应为白色或淡红色,如果裂解不彻底,可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200ul溶液A,振荡至彻底混匀。b、如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量为5-20u1,不需要再用红细胞裂解液处理,直接加200ul溶液A,振荡至彻底混匀。2、向悬浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分颠倒混匀,室温放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分颠倒混匀,65℃水浴消化30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。4、加入2倍体积溶液B(使用前请先检查是否己加入无水乙醇),充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入股附柱中,室温放置2min,5、12000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。8、12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。9、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜ZY悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心1min。10、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,12000rpm离心2min,即可得到高质量的基因组DNA。注意事项:1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增YZ现象。3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。5、绝大多数哺乳动物的全血如入全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响红细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。6、洗脱缓冲液的体积**不少于50ul,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。相关产品:D1850全血基因组DNA提取试剂系统E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE缓冲液T10505×TBE缓冲液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色剂(5000×)全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索莱宝生物科技有限公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体,并能提供技术支持的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为ZX,以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。公司组织结构清晰,内部管理科学,拥有一支既分工细致又高度合作的年轻化队伍,保持了各个部门之间的GX合作运转,充分保障了公司在充满竞争的市场中处于领xian地位。公司注重与业界精英合作,目前公司已经和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman、GBD、ADL、R&D、RB等企业结成紧密的合作伙伴关系,代理其领xian世界的产品,并在全国各地设有分销机构。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些都保证了我们向您提供的是Z专业Zyou质的服务!立足北京,上海,辐射全国,随着产品营销战略的不断延伸,我们将逐步发展成为yi流的专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起,利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神,为ZG生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展,现公司正在诚招各地dai理商和招聘若干销售、研发人员,欢迎垂询并期待您的加入!全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销联系方式上海索莱宝生物科技有限公司电话:021-6485566518018609966传真:021-54261506邮编:200233地址:上海市钦江路15号14层邮箱:solarbio@126.com网址:www.shsolarbio.com全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销上海索莱宝021-54100800
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