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• 2023-03-29 10:05发布了行业资讯

  展会预告 | 恒谱生将盛装亮相2023济南国际生物发酵展

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• 2023-03-18 17:00发布了技术文章

  您不可不知的反相 hplc 流动相的选择

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• 2023-03-18 16:56发布了问答

  液相色谱柱的异常情况及解决方法

   在液相色谱上遇到的问题有很多，例如HPLC 色谱柱的一些常见问题时有出现，可能会令很多实验员感到非常沮丧。那么今天，恒谱生带您了解这些是什么以及如何解决它们可以让您避免数小时的挫败感。 一、无峰值：       可能有多种因素会导致 HPLC 输出中不出现峰或出现非常小的峰。正常读数应该又大又细的峰值，高度也是会有不一样的。小峰或没峰可能代表检测器灯已关闭，没有流动相流量和样品丢失或变质，或者检测器、积分器、进样器阀或记录器这些有问题存在。     其实先要确保探测器是打开状态，然后检查所有连接情况。确保自动进样器样品瓶中有足够的液体和样品中无气泡情况出现，并使用新的标液重新进行系统的检查。 二、无流量：       如果没有出峰，很有可能是HPLC 色谱柱中没有流量；也可能意味着泵已关闭或流量因某种原因中断或受阻；同时泵头中也可能存在泄漏或空气滞留。       如果泵关闭，需要启动泵并检查储液器中的流动相液位和整个系统的流量情况。检查样品环是否有其他障碍物或气塞，并确保流动相组分可混溶且流动相是否能够进行正常脱气。继续检查系统松动情况，检查泵是否有泄漏等其他问题。三、压力问题：      要是压力低于平常或无压力这有可能是系统某处发生泄漏或空气滞留；要是系统压力过高，那么泵、进样器、在线过滤器、保护柱、分析柱或管路都可能有问题。      如果是检查发现是低压，那就要检查整个色谱系统是否存在泄漏、泵密封件故障或阀门损坏的情况等。如果是高压的话，先从移除保护柱和分析柱，并用接头替换，将进样器重新连接到检测器。以 2-5 mL/min 的速度运行泵，并开始查找原因，。如果问题是出现在分析柱上，请在分析柱与检测器断开连接时反转，并冲洗色谱分析柱；在必要的时候更换入口滤芯或更换柱子。 四、裂峰：       如果发现峰出现在中间下降形成M形，那么可能是分析柱入口可能存在一些污染；也可能在色谱柱入口处有筛板被堵塞了或存在了不均匀的空隙；还有可能是样品溶剂与流动相不相容。       如果是入口处有污染，请反转并冲洗色谱柱，并在需要时更换筛板。还可以用具有相同键合相功能的薄膜颗粒重新填充色谱柱顶部，并继续以反向流动方向使用色谱柱；如果是问题出在样品上，请调整流动相中的样品，因为样品和流动相中的 pH 值差异会导致分峰。 五、尾峰和前峰：       发现峰不是直线上升和下降，而是开始在前面或后面就形成轻微的倾斜，则称为前端或尾部。这通常可能是保护柱或分析柱受损或是色谱柱过载。如果有拖尾峰，请先移除保护柱并尝试分析，必要时就需要更换。如果需要恢复或更换分析柱。一定要检查流动相的组成和色谱柱的性能。有前峰的话，请尝试注入更小的体积或稀释样品；如果溶剂有问题请调整溶剂，并使用 50 柱体积的 HPLC 级乙酸乙酯以标准流速的两倍或三倍冲洗极性键合相柱，然后在开始分析之前使用中等极性溶剂。        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

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• 2023-03-18 16:56发布了技术文章

  液相色谱柱的异常情况及解决方法

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• 2023-03-18 16:29发布了技术文章

  高端制造业液相色谱柱，国产崛起打破进口神话

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• 2023-02-21 16:13发布了问答

  为什么我们要关心色谱柱内径？

        相信很多色谱分析员都知道，改变色谱柱内径将对许多变量产生直接影响，包括峰高、信噪比、平均柱效、样品载量、对强注射溶剂的敏感性、压力、分析物保留次、溶剂用量和/或液体废物的产生等多方面问题。市面上的液相色谱柱的内径有4.6 毫米、3.0 毫米、2.1 毫米等等多种选择，那么，为什么会有这么多内径规格呢，下面恒谱生带您了解。一：内径对柱色谱有什么影响？       在柱色谱法中，样品物质在流动相的帮助下穿过柱子。它们根据与固定相的相互作用进行分离，从而产生不同的保留时间。换句话说，可以根据流动相和固定相之间相互作用的类型以及它们通过色谱柱所需的时间来分离和检测分子。那么，柱径如何符合方程式的呢？可以想象，更大的直径使流动相更容易通过。相反，较窄的列意味着这样做需要更长的时间。可以理解为这对敏感性有连锁反应，花在色谱柱上的时间越少意味着灵敏度越低，而时间越长则灵敏度越高。因此，较宽的直径通常会导致较低的灵敏度，而较窄的直径则与较高的灵敏度相关。其实样本量也会有影响，较宽的色谱柱需要更大的样品和更多的溶剂才能进行分析，而窄的色谱柱可以使用较小的样品和较少的溶剂作为流动相。       当然，选择色谱柱并不是只有内径这一种因素，色谱柱的长度和它们能够承受的压力也可能不同。从长度开始，这可以产生与直径类似的效果。较短的色谱柱可缩短分析时间从而降低灵敏度。而较长的色谱柱会增加分析时间并改善结果。基于以上所述，很显然长而窄的色谱柱会提供更加优越的结果，因为它会增加分析时间、提高灵敏度并且不需要更大的样品。但是，推动流动相通过色谱柱需要更大的压力。色谱柱只能承受一定程度的压力，而泵需要能够提供足够的压力，因此在选择时也需要考虑这一点。在泵的出口和进样阀之间可以安装在线过滤器，是能够用来过滤流动相中的杂质和固体颗粒，保护液相系统的正常运行的一种过滤型色谱耗材。在液相色谱系统中，恒谱生在线过滤器可以很大程度上地减少泵、混合器和管路在流动相中输送过程中所产生的堵塞、损坏仪器等情况出现。二：为什么要使用不同直径的色谱柱？       有两个主要优势：其一是减少流动相消耗，其二是减少峰体积。如果将流速调整为恒定线速度，如HPLC柱径改变时保留时间应相同，因此样品运行时间将保持不变。如果运行时间相同且流速降低，则将使用较少的流动相。峰体积（以体积表示的峰宽）随着色谱柱横截面积的减小或直径变化的平方而下降。这转化为成比例的更高的峰，假设相同质量的样品可以加载到色谱柱上，这可能是正确的，也可能不是正确的。因此，假设注入相同质量的样品，从 4.6 毫米内径的色谱柱换成 2.1 毫米的色谱柱应该会将峰宽减少五倍，并将峰高增加相同的量。       当柱直径发生变化时，对流速进行必要的改变以保持恒定的线速度是相当简单的。减小柱径有助于节省溶剂和提高检测限。但是对于较小直径的色谱柱，可能会观察到系统性能的下降。从故障排除的角度来看，很容易将系统性能不佳归咎于色谱柱本身，而真正的罪魁祸首可能是 LC 系统的柱外体积。对柱外效应的相对不敏感是填充直径 5 µm 颗粒的4.6 mm × 150mm 色谱分析柱可能在未来许多年内仍然是常规 LC 工作的主力色谱柱的原因之一。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

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• 2023-02-21 16:13发布了技术文章

  为什么我们要关心色谱柱内径？

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• 2023-02-11 15:52发布了问答

  在 hplc 中改变峰分辨率的方法都有哪些呢？

       相信很多开发HPLC方法的实验研发人员都开发出了无法分离混合物重要成分的方法，其方法可以是调整流动相、固定相或柱温,另一种有效的方法是改变色谱柱粒径。粒径较小的液相色谱柱产生较高的塔板数以获得更尖锐的峰，并且能够分离紧密洗脱的峰。一些高分子量化合物在小孔径填料上可能无法分离，但在用大孔径填料填充的色谱柱上很容易分离。       通常解决紧密或共洗脱峰的有效的方法是改变流动相组成或柱填料颗粒的键合相功能 。众所周知的分辨率方程清楚地确定了影响峰分辨率的三个主要因素：其中Rs是两个靠近洗脱峰的分辨率（间距）；k是代表保留的容量因子；α 是靠近洗脱峰的容量因子的比率；N为代表柱效的柱塔板数。反相 HPLC 是一种非常强大的方法，通常可以毫不费力地实现分离，有时甚至只需要初始操作条件。然而，重叠和叠加的峰通常会产生，因此需要改变操作条件。有几种方法可以提高重叠峰的分辨率或带间距，或者解耦叠加的峰。一、相对保留的调整：      有时可以通过调整容量因子k（保留）值来对分离不严重重叠的峰进行微小改进降低流动相的强度。二、通过提高柱效提高分离度：      适度重叠的峰通常可以通过提高柱效来解决，通过增加柱塔板数来锐化峰（减少峰体积）。一种有效的方法是使用颗粒较小的色谱柱，因为这会增加塔板数并提高柱效。三、通过改变流动相有机改性剂增加谱带间距：      在反相 HPLC 中改善谱带间距的有效方法是改变流动相成分以增加 α 值。如果在初始分离中观察到严重重叠或叠加的峰，则此方法更适合。改变有机改性剂是产生峰间距变化的有效途径。例如，如果初始分离使用乙腈作为有机改性剂并显示出此问题，建议的方法是更换改性剂：先换成甲醇或再换成四氢呋喃。      根据实际情况，有时可以通过增加柱塔板数、使用更小的颗粒或增加柱长来改善分离。但这些方法的缺点是较高的操作压力和较长柱的分离时间增加。其中有效的方法是改变流动相有机改性剂或色谱柱功能，在这种情况下分离时间不会增加，有时可以缩短以实现更快的分离。对于肽和蛋白质等大分子，使用孔径较大的色谱柱颗粒很重要。      今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

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• 2023-02-11 15:52发布了技术文章

  在 hplc 中改变峰分辨率的方法都有哪些呢？

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• 2023-02-11 15:26发布了技术文章

  高效液相色谱法测定橄榄中的防腐剂

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• 2023-01-14 17:59发布了问答

  液相色谱的运作步骤是怎样的呢

        举个例子问您一个问题，您有没有试过在滤纸条上放一小点黑色墨水，然后浸在溶剂溶液中的测试？您没看到墨水是如何开始在纸条上移动并溶解成不同颜色的吗？其实您完成了这个小实验，您就已经记住了什么是色谱。      如果您从事化学工作或研发类实验分析等相关领域，您可能遇到过液相色谱。液相色谱法是一种分析技术，可将液体或混合物样品分离成单独的纯组分。液相色谱技术是准确的，并且由于样品通过设备暴露于一组物理或化学反应而发生，样品经过流动相和固定相以达到最终结果。一、液相色谱过程涉及哪些步骤，是如何完成的：液相色谱法的分离原理基于既定的方法。这是一个简单的总结：1.将作为吸附剂固体的固定相置于其预期的液相色谱柱中。2.含溶剂的流动相开始慢慢通过固定相柱。这个过程根据重力或通过泵发生。3.待分离混合物样品的注入从色谱柱的顶部开始。4.是分离阶段；由于每个元素与吸收材料的不同相互作用，开始将混合物分离成其组分。这导致每个元素的吞吐量都比另一个元素高。这意味着每个组件的移动速度与其他组件的移动速度不同。5.分离出的组分从柱子底多次出机。6.是元器件识别阶段，这些成分被转移到检测器以确定它们的性质。        一旦样品的所有成分离开色谱分析柱，检测器将指示每个成分是什么。这通常以图形形式显示，称为色谱图。该图由表示组分保留或保留时间的水平轴和表示信号强度（即信号浓度程度）的垂直轴组成。色谱图中的每个峰都表明样品中存在一种化学物质，其类型由其保留时间决定。大多数已知化学品都有基于国际标准的典型保留时间，在图表上定义为峰值保留时间。通过图表，可以估计样品中物质的体积和浓度。解离物质的峰高表示其浓度，即已知具有高而宽曲线的物质含有高浓度。 二、液相色谱的应用 ：     工业和应用经常使用液相色谱。包括：医学领域：液相色谱法在医学上用于使用血液样本帮助识别新生儿的遗传疾病。药物制剂：液相色谱法用于药物开发过程中鉴定药物成分。它还经常用于分离用于药物的最纯净形式的化学品。化学领域：液相色谱用于在完成后确定制造的化学产品与预期结果的相容性。环境领域：液相色谱法用于被有害物质污染的环境中，以确定主要污染物质的类型。食品领域：液相色谱法在食品工业中有多种应用。这包括质量控制和确定不同食物的维生素和矿物质含量。教育领域：液相色谱法常用于大学和学校，以教授学生基本的色谱法原理并帮助他们进行重要的科学研究。        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

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• 2023-01-14 17:59发布了技术文章

  液相色谱的运作步骤是怎样的呢

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• 2022-12-31 11:08发布了问答

  药物分析中的高效液相色谱

   在高效液相色谱应用的初期，人们认为它会成为气相色谱的补充方法，然而今天HPLC在药物分析中几乎完全取代了气相色谱。与其他方法相比，在色谱过程中可能会改变流动极性的液体流动相的应用以及根据所测试物质的特性对流动相进行的所有其他修改，在分离过程中具有很大的优势。       任何药物的高效液相色谱 (HPLC) 分析的目的是确认药物的特性并提供定量结果。还可以用于通过药物注册前调查期间的生物医学和治疗研究，进一步了解人体的正常和疾病过程。生物体液（尤其是血浆、血清或尿液）中药物和代谢物的分析是高效液相色谱最苛刻但最常见的用途之一。血液、血浆或血清含有十种浓度远高于分析物浓度的大量内源性化合物。分析物浓度通常很低，对于药物而言，内源性化合物有时在结构上与待测药物非常相似。药物与血浆蛋白的结合也可能发生，这会减少所测量的游离化合物的量。       液相色谱技术对于研究小分子和大分子之间的相互作用非常方便，特别是研究药物-蛋白质结合。部分研发人员已经使用固定化人血清白蛋白相来研究苯二氮卓类药物、华法林、布洛芬等药物的相互作用。使用这个阶段作为体内发生的相互作用的模型可以更进一步。通过在流动相中添加药物，可以研究一种药物与人血清白蛋白的相互作用如何受到另一种药物的影响。       液相色谱还广泛用于对药物制剂进行的药物溶出度研究，以评估进入胃时制剂中药物物质的可用性。将制剂搅拌，溶解浴通常含有旨在模拟胃中条件的水性缓冲液，然后在设定的时间段内对水性缓冲液取样并分析药物浓度。药物稳定性研究至关重要，因为需要避免潜在的有毒降解产物。在此类研究中，有必要证明制剂的药物含量没有随时间变化。此外，如果确实发生降解，则有必要识别和量化降解产物。现阶段在很多国家的药典中都是使用高效液相色谱法代替化学和许多仪器方法来控制药物。      深圳市恒谱生科学仪器有限公司是致力于高品质色谱耗材配件的研发制造OEM为一体的生产企业，专业研发色谱柱、空柱管总成、保护柱、在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、管路接头等。 我们不断地提高研发制备能力、优化管理体系,以严苛的制程管控、优质的产品服务，为各色谱仪器厂家和耗材供应商提供更优质的产品及更有力的服务支持，与大家携手共创美好未来!  今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

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• 2022-12-31 11:08发布了技术文章

  药物分析中的高效液相色谱

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• 2022-12-31 11:06发布了问答

  快看过来！你知道产生鬼峰的原因都有哪些吗？

  近年来随着高效液相色谱仪的检测器灵敏度和色谱柱峰容量的提高，可以在极低浓度下进行检测，但鬼峰问题却成为了人们关注的焦点。恒谱生今天就跟大家聊聊鬼峰产生原因和解决措施吧!一、什么是鬼峰：       如果化合物出现的时间少于预期的保留时间,则称为鬼峰”。这将显示为与注入同一色谱图的化合物具有不同保留时间的峰。色谱中的鬼峰是在小于预期保留时间的间隔内出现的不需要的峰。这些峰通常是由其他化合物或代谢物与溶剂和固定相的相互作用引|起的,这会导致分离度降低，使评估分离质量变得困难。 二、鬼峰的来源：      鬼峰的来源通常分为三类：目标物质以外的杂质、LC仪器的内部污染和流动相中的杂质。(1) 仪器中的杂质      仪器中产生鬼峰的最常见原因是进样器造成的残留。当将针头浸入小瓶中吸取样品时，样品中的物质会成为残留物的来源，因为它们可以吸附到针头的内外表面。那些即使在针头冲洗后也没有被去除的物质被带到下一个分析中，并以鬼峰的形式出现。由于即使在多次空白分析（仅注入流动相的分析）后也会出现表现出特别强吸附的物质，因此可能很难将自动进样器识别为鬼峰的来源。(2) 样品中的杂质      当样品中存在与目标化合物吸收波长相同的杂质时，就会产生鬼峰。由于来自样品的鬼峰不会出现在空白注射中，因此确定来源相对容易。(3) 流动相中的杂质     ①流动相中因长时间使用而产生有机物或空气中的有机物溶解在流动相中     ②由于长期用新流动相补足现有流动相而不是每天或为每组样品准备新瓶而导致流动相被污染     ③使用受污染的有机溶剂和/或水制备流动相     ④使用受污染的流动相试剂 三、出现“鬼峰”怎么办：       如果早期峰是由于样品引起的，那么它实际上不是鬼峰，而是分析中需要考虑的真实样品峰。光散射是表征这些大聚集峰的一个很好的工具，因为即使没有可用于确定摩尔质量的浓度信号，仍然可以确定大小（RMS 半径）和数密度。如果样品中大颗粒的峰渗入其他样品峰，您可以调整目标样品峰的基线以排除较大颗粒的贡献。如果空白注入也能看到鬼峰，那是真正的鬼峰了。       要消除或防止这些鬼峰：在加载和注入步骤中使用压力变化最小的 HPLC 系统。请注意，加载期间的压力仅显示在前面板上，通常不是 HPLC 数据文件中记录的数据的一部分。如果鬼峰或系统峰在多次空白注射中可重现，您可以使用 ASTRA 的基线减法程序从样品注射中减去空白注射的光散射基线。选择脱落最少的液相色谱柱。逐渐改变流速（不超过 0.1 mL/min2）以防止大的压力变化冲击色谱柱。       恒谱生的鬼峰捕集去除柱（又称鬼峰捕集小柱）可以有效吸附流动相中的杂质，从而缩短了方法验证和杂质分析的时间。鬼峰捕集去除柱主要的特点是能够去除溶剂包括有机溶剂中的杂质。反相色谱梯度分析时，将鬼峰捕集小柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

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• 2022-12-31 11:06发布了技术文章

  快看过来！你知道产生鬼峰的原因都有哪些吗？

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