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核酸提取仪

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核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。

核酸提取仪
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核酸提取仪原理
核酸提取仪原理和注意事项
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核酸提取仪核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。

磁珠法核酸提取仪的基本原理

磁珠法核酸提取仪通常包括磁棒法和抽吸法。

1. 磁棒法

磁棒法是利用磁珠的转移,液体的固定来使核酸的分离得以实现。其和抽吸法的原理和过程相同。磁珠和液体分离的方式有差异。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附从废液中分离开磁珠,在下一步的液体中将其放入,使核酸的提取得以实现。

2.抽吸法

抽吸法又称为移液法,,是利用液体的转移或者磁珠的固定来使核酸的提取得以实现的。通常利用对系统控制机械臂的操作来实现转移,有如下提取过程:

1) 裂解:

将裂解液加入到样品中,利用机械运动及加热来混匀反应液和使反应充分。裂解细胞,使核酸释放出来。

2) 吸附:

将磁珠加入到样品裂解液中,充分混匀,通过磁珠在高盐低PH值下对核酸亲和力很强的特点,对核酸吸附,在外加磁场作用下,分离磁珠与溶液,通过吸头转移到废液槽中,弃掉吸头。

3) 洗涤:

将外加磁场撤去,使用新吸头将洗涤缓冲液加入,充分混匀,将杂质去除,在外加磁场作用下,移出液体。

4) 洗脱:

将外加磁场撤去,使用新吸头将洗脱缓冲液加入,充分混匀,结合的核酸就和磁珠分离,从而使纯化的核酸获得。

注意事项

1.核酸提取仪至少离其他竖直面10cm。

2.仪器的输入电源线必须接地以防止触电事故。

3.操作人员不可以擅自对仪器进行拆解,必须有持证的专业维修人员完成更换元件或进行机内调节等操作,当接通电源时,不要更换元件。

4.相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下,正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃为仪器的安装环境。

5.不要在如电暖炉等靠近热源的地方放置仪器应当防止将水或者其他液体溅入电子元件中以避

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核酸提取仪分类
核酸提取仪分类和特点
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核酸提取仪核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。

分类

1.按照仪器型号大小不同来分

1) 小型自动核酸提取仪

小型的自动化仪器能够任何实验室得到应用,其利用特殊的运行结构来使得自动提取核酸的目的达到。

2) 自动液体工作站

自动液体工作站有着非常强大的功能,可以自动完成液体分液、吸液等,甚至于能够通过对扩增、检测等功能进行整合完成标本的提取、扩增。其功能的其中一个应用是提取,常规实验室提取核酸其不太适合,通常均在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上应用。需要比较大的资金花费在自动工作站的平台建立及平台的运作。

2.按照提取原理不同来分

1) 采用磁珠法的仪器

将磁珠作为载体,利用磁珠在低盐高PH值下与核酸分离,在高盐低PH值下吸附核酸的原理,再通过对磁珠移动或者将液体转移使核酸的整个提取纯化过程得以实现。因为其独特的原理,因此,能够设计成很多种通量,除了能够单管提取,还能够提取8-96个样本,并且其操作简便,只需要30-45min就能够提取96个样本,使得实验效率大大提高了,并且有着低廉的成本,所以能够应用在不同实验室,就目前市场来说,其是主流的机器。

2) 采用离心柱法的仪器

离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量通常为1-12个样本。和手工提取相比,操作时间差不多,并不会使得实际工作效率提高,而且有着昂贵的价格,不同型号仪器的耗材也不能通用,只在经费充足的大型实验室适合使用。

磁珠法核酸提取仪的特点

1.纯度高,得率高。

2.没有污染,并且有着稳定的结果。

3.有着低廉的成本,广泛地应用很方便。

4.不同类型的样本能够同时处理。

5.自动化、高通量操作 能够实现。

6.操作快速、简

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核酸提取仪特点
核酸提取仪特点以及应用领域
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核酸提取系统是经多年研制开发而成,用于高质量核酸的提取,以低成本,小投入来使核酸提取纯化得以实现的自动操作系统。

简介

分子生物学研究以核酸提取纯化为起点,若要进行分子生物学研究的下一步工作,还必须将高质量的核酸提取到。Z初核酸提取实验的操作技术难度高,经过不断地演化发展,到目前为止,常规的核酸提取实验已经基本没有任何技术含量。 核酸提取仪的系统可以使一天20-200个标本的提取纯化工作轻松地实现。

创新:

1.试剂管条设计大容量,Zda处理液体体积达到2ml。

2.8连管条独立设计,并且可以封装,除了能够使所有核酸提取纯化所需要的步骤及分装试剂得到满足,而且能够按照实验要求对提取标本数量进行确定。

特点:

1、 工作范围广:

提取标本能够从从几微升至1ml,能够在一个平台上实现质粒、细菌、血液、组织、血清等所有标本的核酸提取。

2、 操作简单:

仪器内内置核酸提取纯化程序,实验时仅需要对所需要的运行程序进行选择就行。在试管条内封装提取纯化所需要的试剂。试剂不需要手工加入。

3、 投资成本Zdi:

不管仪器、试剂、耗材,在同行业成本都是Zdi。

4、 通量高:

系统配置二台核酸提取仪,和一个小型自动液体工作站的工作量相当。

5、 标准化、自动化:

所有核酸提取纯化工作由仪器自动完成,获得标准、统一的提取结果。

应用领域:

商检、疾控ZX、血站、质检等应用领域

科研院所、高等院校等应用领域

法医应用领域

医院、妇幼保健、计生科研等应用领域

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核酸提取仪方法
核酸提取仪CTAB法
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CTAB法是提取DNA主要的方法,其他方法还有生物方式:酶法,化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法,物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。

分类

细胞器DNA、细胞核DNA。

单链环状、双链线性、双链环状。

组织DNA、细胞悬液DNA、、病毒DNA、质粒DNA、真核生物DNA、细菌DNA。

提取原则

1.应当将如蛋白质、多糖和脂类分子等其他生物大分子的污染应降低到Zdi程度。

2.应当尽可能去除如RNA的其他核酸分子。

3.使核酸一级结构的完整性得以保证。

4.不应当有对酶有YZ作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子存在于核酸样品中。

提取方法

1.表面活性剂快速制备法

使用Triton X-100A或NP40表面活性剂对细胞破碎,然后使用蛋白酶K或酚将蛋白去除,使用乙醇沉淀或透析。

2.加热法快速制备

温度96℃-100℃加热5min,之后离心后取上清,能够在PCR反应时使用。

3.碱变性快速制备

首先使用NaOH作用20min,再将HCI加入中和,离心后取上清,含有少量DNA。

4.玻璃棒缠绕法

使用盐酸胍对细胞进行裂解,在乙醇上铺上裂解物,然后在界面使用带钩或U型玻璃棒轻搅,在玻棒绕DNA沉淀液,使得80kbDNA生成。

5.异丙醇沉淀法

6.酚抽提法

首先使用蛋酶K、SDS对细胞进行破碎,化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb。

7.甲酰胺解聚法

和上面方法一样先将细胞破碎,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得200kb左右DNA。

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核酸提取仪应用
核酸提取仪应用
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核酸提取系统需要应用配套的核酸提取试剂来使得核酸的提取工作自动完成。核酸提取仪,又被称为核酸纯化仪,是应用配套的核酸提取试剂来使核酸的提取工作自动完成的仪器。此仪器Z近几年才得到应用和推广。

应用

1.临床样品的分子诊断

自动核酸提取仪能够对临床样品快速高通量的处理,提取的核酸能够被用来后续的分子诊断,对于福 尔 马 林固定石蜡包埋(Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE)的组织样品同样适合。

2.畜牧兽医

能够对立克次体(Coxiella burnetii),牛病毒性泻病毒(Bovine viral diarrhea virus),猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),新城疫病毒(Newcastledisease virus),禽流感病毒(Avian influenza virus)GX、高灵敏度地提取。

3.法医学的应用

对于法医工作而言,注重的是核酸提取的效率和稳定性,自动核酸提取仪配合门的法医样品核酸提取磁珠试剂使用,能够从包括烟蒂、毛根、软骨、指甲、血痕等不同来源的材料中对高质量的DNA进行纯化。

4.核酸提取仪应用领域

与生物分子相关的分离纯化工作几乎在每个实验室均是必不可少且十分重要的。然而多个样品的纯化还是十分困难的,不但选择的纯化技术要合适,并且有着特别大的工作量。当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求很难得到满足。磁珠自动核酸提取纯化系统是使用磁珠法技术,能够在食品安全、法医鉴定、疾控YL、基因组学等领域得到广泛地应用。

5.基因组学

对于基因组学的研究,自动核酸提取仪非常适合,微生物、动物、植物或是病毒均是能够取样本的来源。动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒、白细胞层全血基因组提取试剂盒、全血基因组DNA提取试剂盒能够使得足够数量和纯度的DNA或RNA快速的纯化出来。对于如North

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