吉博士大讲堂 | 想要更高的制备回收率？你需要……(一)

Hi 大家好，

Gilson新推出Dr.G（吉博士）大讲堂系列，

为大家娓娓道来关于色谱的相关知识。

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**期

想要更高的制备回收率？

你需要……

(一)

       HPLC技术已经成为行业中的标准分离技术，影响我们日常生活的方方面面。我们使用的肥皂、沐浴露，都需要通过液相色谱及其他各类方法进行质量检测。让我们光鲜亮丽的各类衣物、香甜梦想的床上用品织物，各类织物特性改变剂和染料也都需要通过色谱进行分析研发。毫不夸张地说，色谱已经是我们绚烂生活无法离开的一个技术之一。

什么是GX液相色谱技术？

       GX液相色谱技术（High  Performance  Liquid Chromatography）是色谱技术的一个重要分支，自上世纪60年代被发明以来，成为化学分析中用于分离、鉴定定量混合物中组分的常用技术，也常被叫做高压液相色谱。化合物溶液通过液态流动相带动流经固定相后根据相对于固定相的保留度（Rf）不同而被分离。

       在实验室里，典型的GX液相色谱的硬件通常包含：

       而和分析液相对应的制备液相,为了收集分离出来的化合物,通常还配一个馏分收集器。

如何才能提高制备色谱的回收率？

进样对制备色谱回收率又有何影响？

       液相色谱的进样中需要一个模块的参与-进样器，顾名思义，就是将样品导入色谱流路的功能组件。搭载不同，进样阀也不同（如下图）。

                 Rheodyne手动进样阀                                                        Gilson DIM自动进样阀

       进样阀上有一个小的配件- 样品环，专门用于液相色谱的进样体积定量，一般采用不锈钢材质。我们在操作分析型液相色谱手动进样时，一般会吸取超过样品环标定体积3倍以上的样品，然后注入样品环，这样才能完全置换定量环内的流动相，消除管壁效应，以确保样品分析数据的准确和重现性。这种进样方式我们称为满环进样。

                     样品环                                                                            样品管壁效应

制备液相中，

我们该如何正确进样？

       分析型液相色谱的主要聚焦点是能获取准确重现的数据，而制备液相色谱则在于如何收集更多的目标组分。因此，我们用于分析型液相色谱的常用进样方法-满环进样在这个时候就有点不合时宜了。如果采用满环进样，那么超过样品环标定体积的那部分样品直接就去了废液，无法被洗脱、收集，导致回收率低下，对于制备液相色谱的用户而言是完全不可接受的。

       为了得到更高的回收率，我们在操作制备液相色谱时就会采用另一种进样方法-部分进样。正如前面提到的管壁效应，当接近于样品环体积的样品完全被注入样品环时，其前部其实已经流出了样品环。因此，我们在使用制备色谱分离样品时，一定要控制进样体积。一般建议不要将进样体积超过样品环标定体积的一半为佳。这样，所有进样样品都可以被切至色谱流路并被分离洗脱直至被收集。

       和进样方法同样重要的是进样模块，在液样色谱的进样环节扮演着极其重要的作用，尤其是在更需要自动化的制备色谱系统中，一旦进样模块出现问题，那么经常会导致样品丢失的情况。

       这里就不得不提一下Gilson的DIM直接进样阀组件设计，通过去除传统进样阀口的转移管路，消除了Z容易造成样品丢失的环节。同时，因为将死体积降至Zdi，也更加有益于提高回收率。如果您需要制备的样品非常珍贵，那么首先就要考虑在进样环节确保没有样品丢失。

Gilson DIM自动进样阀

下期预告

如何才能更好地提高制备色谱的回收率？