金银花中三种挥发油的测定

前言

挥发油（Volatile oils），又称精油（Essential oils），是对植物或中草药中一类具有芳香气味的、在常温下能挥发的油状液体的总称。在常温下能挥发，可随水蒸气蒸馏，挥发油是具有广泛生物活性的一类常见的重要成分。金银花为忍冬属植物之花蕾，本草载作清热解 毒 药，主治温病发热、斑疹、咽疼等，近代用金银花挥发油制剂ZL各种感冒，LX很好。

固相微萃取（Solid Phase Microextraction，SPME）是以熔融石英光导纤维或其他材料作为基体支持物，利用“相似相溶”的原理，在其表面涂渍不同性质的高分子固定相薄层，通过直接浸入或顶空方式，对待测物进行提取、富集、进样和解吸。自1989年发明以来，由于其操作简便、节省溶剂的特性，现在已成为样品前处理应用中重要的萃取技术之一，广泛应用于水、土壤、空气等环境样品的分析。

本实验以全自动样品前处理平台AStation为基础，采用全自动固相微萃取模式，以顶空提取的方式对金银花中的三种挥发油成分进行了相关分析。

1、实验过程

1.1  仪器与试剂

全自动多功能样品制备进样平台：AStation，配备孵化模块（Agitator Module），萃取头老化模块（SPME Fiber Conditioning Module），SPME Fiber萃取头（DVB/CWR/PDMS，80μm×10mm），莱伯泰科公司；

气质联用仪：7890B-5977B气质联用仪，安捷伦公司；

挥发油标准使用液（芳樟醇、α-松油醇、香叶醇）：1μg/mL；

超纯水制备仪：Simplicity，MILLIPORE公司；

氯化钠：分析纯，北京化工厂；

正己烷：色谱纯，Fisher 公司。

1.2  挥发油测定过程

1.2.1标准曲线配制

取6个20mL顶空瓶，加超纯水5mL，加入1.5gNaCl，分别加入挥发油标准使用液0、1、2、5、10、100μL，将顶空瓶置于AStation样品盘，待测。

1.2.2金银花样品重复性实验

取6个20mL顶空瓶，加入粉碎的晒干金银花样品0.2g，然后加入1.5gNaCl和5mL超纯水，将顶空瓶置于AStation样品盘，待测。

1.2.3 固相微萃取SPME萃取过程

萃取头老化温度250℃，老化时间3min；

萃取前孵化时间10min，孵化温度70℃，孵化震荡速度250rpm；

萃取时间30min，萃取震荡速度250rpm，萃取温度70℃，解吸时间2min。

图1 SPME萃取挥发油流程

1.3GC-MS测定条件

a）色谱柱：HP-5ms  30m*0.25mm*0.25μm；

b）进样口温度：250℃；

c）进样模式：不分流，分流开启时间2min；

d）柱流速：1.0mL/min（恒流）；

e）柱箱温度：初始温度50℃，保持1min；以10℃/min升温至150℃；以20℃/min升温至290℃，保持2min；

f）四极杆温度：150℃；离子源温度：280℃；传输线温度：280℃；

g）扫描模式：选择离子扫描（SIM）。

三种挥发油的保留时间、定量及定性离子见表1。

表1  三种挥发油的保留时间、定量及定性离子

2、挥发油测定结果

2.1挥发油色谱图

图2为三种挥发油的色谱图，图3为超纯水空白色谱图。

图2  SPME萃取挥发油色谱图

图3空白水色谱图

2.2校准曲线结果

以水作为基质加标，通过SPME顶空萃取方式进行挥发油萃取，经气质分析得到的线性结果见表2，线性系数为0.9988-0.9994，具体校准曲线见图4-图6。

表2   三种挥发油线性结果

图4  芳樟醇的校准曲线

图5  α-松油醇的校准曲线

图6  香叶醇的校准曲线

2.3样品重复性结果

六组金银花样品SPME萃取数据见表3，样品重叠色谱图见图7。

表3 金银花样品重复性

图7 六组金银花样品重叠色谱图

3、结论

本方法以全自动多功能样品制备进样平台AStation为基础，通过全自动固相微萃取（SPME）顶空方式对金银花中的三种挥发油进行萃取，经气质分析得到以水为基质的三种挥发油的线性数据，线性系数为芳樟醇0.9988、α-松油醇0.9994、香叶醇0.9991，金银花样品萃取结果重复性RSD为芳樟醇10.2%、α-松油醇12.2%、香叶醇11.0%。

本实验中采用的固相微萃取方法简便、快速，能够实现金银花中挥发油萃取及在线分析的全自动操作，可用于痕量挥发油类物质的检测分析。