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实验室日常的一天

从离心开始

……

使用台式离心机提取基因组 DNA

美妙的电机马达声响起

那是独属于你的交响乐演奏

按照常规的提取 protocol

整个实验过程需要

至少使用离心机 3 次以上……

这些东西重复了许多遍

也许你早已刻入骨 髓

但你真的理解

不同离心机之间的区别吗

…… 

小 E 最全离心机科普来了！

这些常伴你左右的“分离管家”

你真的了解它吗？

快随小 E 一起来看看吧！

*文末有福利，千万不要错过哦

离心机基本原理

离心机是一种高速旋转的仪器，在驱动电机的带动下，载有样品的转子围绕离心轴进行快速旋转，过程中产生的离心力模拟地球重力场的作用，使样品做沉降运动，从而对不同密度或不同颗粒大小的样品进行快速沉淀分离。

作为生物实验室的“分离管家”，离心机除了能够提取 DNA、RNA、质粒、感受态细胞外，各种生物大分子和纳米材料的获取和制备也离不开它，离心机俨然已经稳坐科研和生产实验室仪器 C 位。

虽然对于离心机大家都不陌生，但是，型号如此众多的离心机，它们究竟是如何划分的呢？

离心机分类标准

离心机按照用途可分为：

▲ 分析型离心机

▲ 制备型离心机

制备型离心机一般用来分离各种生物材料，分离的样品量比较大，也是大多数科研实验室配备的离心机种类。

制备型离心机按转速又可以分为以下三类：

  ▲ 低速离心机

  ▲ 高速离心机

  ▲ 超速离心机

低速离心机的转速一般低于 15,000 xg，往往是体型紧凑的台式离心机。

按功能划分，又可分为微型台式离心机和多功能台式离心机。

部分台式离心机具有冷冻离心的功能。

多用于小规模样品中可沉淀颗粒的分离例如从培养基中分离细胞，或者制备常规的组织匀浆；

高速离心机一般指的是转速介于 15,000 xg～110,000 xg 的离心机，根据离心体积可以分为台式高速离心机和落地高速离心机。且很多高速离心机具有冷冻功能，往往又被称为高速冷冻离心机。

大容量离心机，大多为落地款。

且很多高速离心机具有冷冻功能，往往又被称为高速冷冻离心机。

主要用于菌体、细胞器的分离和生物大分子的制备。

超速离心机顾名思义，转速往往高于 110,000 xg，甚至高达 1050,000 xg，能满足低温离心的需求。

多用于亚细胞结构的分离和生物大分子如核酸、蛋白、病毒颗粒、纳米粒子等的大规模制备。

虽然这三种类型的离心机功能不尽相同，但往往需要搭配使用，有时甚至缺一不可。

应用流程中的离心机使用

以大规模制备腺相关病毒（Adeno-Associated Virus，AAV）载体为例，由于 AAV 安全性好、宿主细胞范围广以及不整合到宿主细胞基因组等诸多特点，使得离心机成为基因治 疗中的得力工具。

可以说，从上游分子克隆阶段中重组载体的构建，到下游产物表达中病毒颗粒的回收，离心机的身影无处不在。

重组载体的构建和细胞培养

将外源基因构建到 AAV 载体的过程中，重组质粒载体的制备纯化离不开台式/高速离心机，而细胞转染前的复苏阶段，多功能台式离心机的水平转子则可以帮助复苏的细胞进行温和沉降，为后续细胞转染/AAV 包装做准备。

Eppendorf 5910Ri 离心机搭载气密性 Quicklock® 转子盖，能够时刻保证离心病毒颗粒等危险样品的安全性。且独特的通用水平转子 S-4xUniversal 可满足多种耗材的无缝离心切换，一台搞定多种离心操作。

rAAV颗粒的收集和纯化

从产生重组病毒颗粒(rAAV)的细胞中分离 rAAV 的过程中，由于 AAV 病毒颗粒（直径介于20nm-26nm）的沉降系数较小、低转速，低离心力无法使病毒沉降，通常需要 60,000 ×g 以上的离心力来进行有效分离。

因此，破碎细胞后，需要利用高速离心机对溶液中的 rAAV 进行初步富集。在这一步骤中，提取出的 rAAV 颗粒溶液中仍旧包含部分宿主蛋白和核酸，因而需要更近一步的纯化或细胞转染验证。

Eppendorf 高速落地离心机系列，可提供独特的 1.5L 大容量三角瓶，最 高可满足 6L 的离心容量，加快样品的收集流程，让您快速离心，省事放心！

高纯度 rAAV 颗粒的制备

对于转入动物体内乃至需要应用于临床的 rAAV，下游的精细纯化步骤至关重要。我们的最 终目的是需要保证 rAAV 的高纯度，不能含有任何残留的细胞或培养基杂质。而病毒颗粒的大规模纯化，目前最主流的方法之一是基于超速离心机的氯化铯或碘克沙醇法的密度梯度离心。这个方法可以有效地清除空白病毒粒子，并填补其他纯化方法的短板。

Eppendorf CP-NX 系列超速离心机可搭载多种特定离心转子，满足大量病毒样品高纯度的分离纯化需求。

此外，CP-NX 系列超速离心机还可提供生物安全选项（可在工厂或现场完成微滤器改造），保证病毒样品分离纯化过程的生物安全性，保障实验人员及环境安全。

专业、安全、高效、便捷一直都是我们的一贯宗旨，无论您是初出茅庐的实验室的小白，还是深谙样品制备的宗师级人物， Eppendorf 离心机全线产品均可满足您在研发、生产环节中对于离心机的需求，并为您提供及时的技术支持与保障。

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活动一：秀出搭档

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活动二：发文有奖

如果您已经在 Eppendorf 品牌的高速落地/超速离心机的协助下发表文章，参与活动即可获得价值 500 元的科学有“离”奖！

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*活动须知：台式离心机仅限 Eppendorf 品牌，高速落地/超速离心机仅限Himac（Hitachi / 日立）品牌

如何查阅活动结果？

在公众号对话框中输入“活动结果”就会显示近期活动结果,还未显示的活动请不要着急哦，小 E 会在活动结束后的 10 个工作日内公布。