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有望1分钟内完成肿瘤活检 | 《NATURE》子刊发表活体荧光内窥式激光共聚焦成像技术在诊断口/咽/食道癌上的新技术

发布:广州云星科学仪器有限公司
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       一些暴露在体表外的上皮组织肿瘤导致的癌症,如口腔癌、口咽癌和食道癌,相较于其他组织癌症更容易通过观察和鉴别粘膜表面的可见变化进行筛查。但是根据美国国家癌症研究所的数据显示,只有29%的口腔癌和口咽癌和19%的食道癌是在癌症早期发现的。对于非转移性肿瘤,5年生存率分别为83.7%(口腔癌和口咽癌)和45.2%(食管癌);而转移性肿瘤的5年生存率则分别只有39.1%和4.8%。手术边缘残留肿瘤的存在也会产生负面影响,这说明:目前临床的肉眼判断结合活检为基础的组织病理学诊断还不能够达到良好的早期诊断目的。

       早期发现肿瘤和术后检查残余肿瘤的准确性是直接关系到癌症复发率和患者生存率的预后因素。美国纪念斯隆-凯特琳癌症ZX的Thomas Reiner团队利用DNA修复酶PARP1作为癌症细胞的靶向高对比度标记物,结合OptiScan公司的ViewnVivo活体荧光内窥式激光共聚焦成像技术,发明了一种快速、灵敏的活检手段,应用于早期上消化道上皮性肿瘤的手术边缘评估。该项研究于2020年3月发表在《nature》子刊《biomedical engineering》上。

图1. PARPi-FL应用于新鲜组织的共聚焦显微成像具有与组织切片同样的清晰度.png

图1. PARPi-FL应用于新鲜组织的共聚焦显微成像具有与组织切片同样的清晰度

        PARPYZ剂奥拉帕尼是获得FDA批准的药物,PARPi-FL是该类YZ剂的荧光标记类似物,因其对PARP1具有高度的亲和力和特异性,可作为PARP1的靶向显像剂。PARPi-FL是一种细胞穿透成像剂,在没有与机体内细胞进行靶向结合的情况下可被快速代谢清除。与其他核染色活性染料相比,PARPi-FL不插入DNA,而是可逆地与PARP1结合,PARP1作用于DNA链断裂,不具有致突变性。前人利用静脉注射PARPi-FL后证明其可作用于全身和细胞水平上高对比度异种移植成像。并且,PARPi-FL的组织穿透性使其能够替代静脉注射作为局部药物使用,应用小剂量的PARPi FL即可立即成像。

图2. PARP1作为肿瘤标志物具有很强的特异性和标志物信号强度.png

图2. PARP1作为肿瘤标志物具有很强的特异性和标志物信号强度

       与组织深层深层和上皮相比,肿瘤内PARP1阳性区域明显高于上皮(5.0%±1.9%,P = 0.03)和组织深层(0.9%±0.5%,P = 0.02)(图2b)。利用viewnvivo从组织表面垂直断层扫描的结果表面,深层的影像也可十分清晰捕捉(图2c)

       Thomas团队在对PARP1在食管癌中的表达研究中发现,包括腺癌和鳞状细胞癌(T1-T3期)在内的一些肿瘤组织,PARP1表达水平均高于正常上皮和粘膜下深层组织,表明正常组织和肿瘤组织之间存在明显的定量差异。PARP1表达增加导致PARPi-FL摄取增加,这个增加的比例在肿瘤中高于正常组织20倍。研究人员对比了多个动物模型,发现PARP1表达比例Zdi的是小鼠模型,但即使这样,小鼠模型中PARP1在肿瘤中的PARPi-FL信号也比在正常食管中高出了6倍。这些数据表明,用上述方式在食管中进行高对比度无创内镜成像是可行的。

图3. PARPi-FL共聚焦影像活检在临床上的应用.png

图3. PARPi-FL共聚焦影像活检在临床上的应用

       为了进行PARPi-FL的人体成像,让经组织病理学确诊的口腔鳞状细胞癌患者用含PARPi-FL的溶液漱口后,使用多光子成像技术拍摄荧光图像。良性肉芽肿(蓝圈)和肿瘤(黄圈)区域都有PARPi-FL积累,但是特异性的PARPi-FL仅在肿瘤中可检测到。表明了相较于良心增生组织,肿瘤对于PARPi-FL具有很强的特异性,可以应用于影像学提高癌症检出率。虽然使用PARPi-FL作为荧光造影剂还在临床试验中,但上述实验可以证明使用漱口水的方法进行局部肿瘤活体评估已成为可能。

图4. ViewnVivo活体荧光内窥式激光共聚焦成像系统.jpg

图4. ViewnVivo活体荧光内窥式激光共聚焦成像系统

       Z后,搭配ViewnVivo活体成像技术的PARPi-FL激光成像结果与免疫组化PARP1组织切片染色结果非常相似,活体成像Z快 1分钟即可完成。一旦外科医SF现阳性边缘,可以立即进行再次切除和边缘评估。在PARPi-FL共聚焦荧光成像后可保持新鲜组织完整,该组织可用于后续其他研究,如组织病理学、蛋白质组学或基因组分析。

图5. 操作简便的ViewnVivo成像效果与光学显微镜下免疫组化染色结果相媲美.png

图5. 操作简便的ViewnVivo成像效果与光学显微镜下免疫组化染色结果相媲美

       相信不久以后,活体荧光内窥式激光共聚焦成像技术诊断恶性肿瘤方法会普及应用到早期鳞状上皮癌症的诊断,帮助外科医生对手术进行评估,提高检出率,减少患着痛苦。


2020-04-09
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