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TSKgel亲水性聚合物基质蛋白分离用色谱柱的清洗方法

发布:东曹(上海)生物科技有限公司
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GX液相色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,出现柱效下降或伴有峰型拖尾、分叉等情况。需要定期进行清洗和再生,以保证色谱柱的柱效和使用寿命。

不同类型的色谱柱都有与之对应的清洗方法。本篇推送为大家带来TSKgel亲水性聚合物基质蛋白分离用色谱柱的清洗方法及注意事项。


TSKgel亲水性聚合物基质的蛋白分离用色谱柱,包括SuperQ-5PW, DEAE-5PW, SP-5PW, CM-5PW, DEAE-NPR, SP-NPR, BioAssist Q/S这几个型号的离子交换色谱柱,还有疏水、亲和等其他多种类型的柱子。


吸附的主要原因

此类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能团脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,在柱子长时间使用后,样品组分的洗脱情况还是会发生改变的。其原因与样品中极微量的吸附物在柱中的蓄积有关。特别是生物样品组分复杂,这种吸附现象(非特异性吸附)时有发生。


清洗方法

①先使用0.1~0.2 mol/L氢氧化钠水溶液或20~40%的醋酸水溶液进样清洗(100 µL, 3~5针)即可冲掉色谱柱上吸附的杂质。如果采用该方法清洗后,色谱柱性能仍无法恢复,再考虑以下两种方法。

②去除疏水性杂质:在清洗液中添加10-20 %的甲醇、乙腈等有机溶剂后过柱清洗。

③去除难溶性蛋白:在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3 %的中性表面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后过柱清洗。但需注意尿素及界面活性剂可能在柱中残留。

2020-12-10
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