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重组人生长激素的HPLC分析
发布:东曹(上海)生物科技有限公司浏览次数:1217重组人生长激素(简称r-hGH)由重组DNA技术生产而得,是一条由191个氨基酸组成的多肽链,相对分子量为22125。重组人生长激素的主要功能是促进身体组织细胞生长、调节代谢及免疫系统。
2015版《ZG药典》中规定,采用分子排阻色谱法,选用适合分离分子量为5000~60,000球状蛋白的亲水改性硅胶填料的色谱柱,对重组人生长激素进行含量测定。
本应用参照上述药典方法,使用SEC色谱柱TSKgel G2000SWXL,以异丙醇-磷酸盐为流动相,流速0.6 mL/min,检测波长214 nm,对重组人生长激素进行分析。
溶液配制
样品稀释液:将检测用流动相稀释2.5倍:0.025mol/L PB buffer, pH 7.0-IPA (97:3)
重组人生长激素单体-二聚体:用上述样品稀释液将冻干粉溶解至2mg/mL。
分析条件
色谱柱:TSKgel G2000SWXL (7.8 mm I.D.×30 mm,5 μm)
流动相:0.063mol/L PB buffer, pH 7.0 - IPA (97:3)
流速:0.6 mL/min
柱温:RT
紫外检测器:214 nm
进样量:20 mL
分析结果
重组人生长激素单体与二聚体的分离谱图
总结:
使用TSKgel G2000SWXL (7.8mm I.D.×30 mm,5μm) 分离重组人生长激素,峰形良好,单体峰与二聚体峰的分离度可达2.2,完全满足药典要求。
2021-03-20相关仪器 -
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