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采用TSKgel G4000SWXL尺寸排阻色谱柱分离口蹄疫灭活疫苗146S抗原

发布:东曹(上海)生物科技有限公司
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概述

口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease, FMD)是一种感染牛、羊和猪等偶蹄动物的具有高度传染性的动物疫病。口蹄疫病毒培养物可以分离出不同密度的粒子,主要有四种:完全病毒粒子(146S)、空衣壳(75S)、12S蛋白质亚单位(12S)、病毒相关感染成分(VIA抗原4.5S)。146S抗原含量是决定口蹄疫疫苗质量和免疫效力的关键因素。

本篇应用是采用凝胶色谱柱TSKgel G4000SWXL对口蹄疫灭活疫苗146S抗原,进行GX尺寸排阻色谱 (HPSEC) 的分离检测


01 样品的制备

口蹄疫灭活疫苗146S抗原参考方法[1]制备。


02 分析条件

色谱柱:TSKgel G4000SWXL (7.8 mm I.D.×30 cm, 8 μm)

保护柱:TSKgel guardcolumnSWXL (6.0 mm I.D.×4 cm)

流动相:50 mM PB+0.1 mM Na2SO4(pH 7.2)

流速:0.6 mL/min

进样体积:100 μL

柱温:室温

检测器参数:UV @259 nm


03 分析结果


型)146S抗原纯化样品色谱图.png

口蹄疫灭活病毒(O型)146S抗原纯化样品色谱图


04 结果与讨论

实验结果表明:使用凝胶色谱柱TSKgel G4000SWXL可对口蹄疫灭活病毒146S抗原进行GX分离检测,线性范围0.56-67.42 μg/mL,相关系数R2大于0.99(n=10)。


参考文献:

1. 徐嫄等. 应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量,生物工程学报,2018,34(5):676-684.

2021-06-15
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