抗体亲和层析之Protein A填料家族史介绍

单克隆抗体在目前仍是广泛使用的生物治 疗药物。Protein A 填料具有高亲和性、可操作性、可放大性以及法规记录，因此几乎所有商业批准的 mAb 制造工艺均使用 Protein A 填料捕获作为下游纯化的初始步骤。Cytiva 为更好地适应客户的需求，对蛋白 A 填料产品不断升级改造，推陈出新。

图 1：Cytiva 蛋白 A 填料产品家族发展史

Protein A

Protein A 是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，分子量 42KD，它含有 5 个可以和抗体 IgG 分子的 Fc 段特异性结合的结构域 (见图 2)。

图 2：金黄色葡萄球菌 Protein A

Protein A 填料作为抗体纯化的核心步骤，在纯化过程中需要进行在位清洗  (clean-in-place, CIP) 以达到重复利用的目的，节省高昂的层析介质成本。氢氧化钠  (0.1-0.5 M) 溶液是最有效的清洁剂，但天然 Protein A 受其序列限制不能耐受高浓度的碱液清洗。Cytiva 利用基因重组技术重新改造，具备高耐碱性与高亲和力的 Protein A 配基应运而生  (见图 3)。

图 3：耐碱配基的研发过程

表1：Protein A Sepharose家族成员

Protein A 填料特异性亲和纯化抗体后，再采用离子交换和/或疏水层析进一步除去核酸、宿主蛋白、脱落的微量 Protein A 配基等杂质。为了更好地适应生产需求，采用高流速琼脂糖作为骨架，填料的刚性和传质性能大大优于传统的 Sepharose 4FF 和 6FF 琼脂糖骨架（见表 1），推出 MabSelect（17519902）、MabSelect Xtra（28408260）、MabSelect SuRe （17543802）、MabSelect SuRe LX（17547402）、MabSelect PrismA（17549802）系列产品，可以在大规模生产时，使用更高流速而保持更高的载量，大大提高生产效率（见表 2）。

表 2：MabSelect 家族成员

MabSelect PrismA（17549802）作为 Cytiva 明星产品，专为gao效捕获 mAb 工艺设计，不仅提升了工艺效率，而且缩小填料体积仍能达到相同的通量，并且较高的耐碱性使得产品的寿命更长，使用成本更低。目前已经被越来越多的客户广泛接受并使用。

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*本次活动ZZ解释权归Cytiva所有。