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如何提高MCAO造模成功率?来学技巧!
发布:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司浏览次数:1388如何提高MCAO造模成功率
大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO),是一种局灶性脑缺血模型,是目前应用广泛的脑缺血模型。其发病机理与人类缺血性脑卒中表现相似,对于制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药物筛选有重要意义。
但在实际操作中,往往因为各种原因,导致造模不成功。如何才能提高MCAO造模成功率?技巧来了:
●上海交通大学Med-X研究院副院长杨国源教授为你讲解小鼠MCAO模型的过去,现在和将来!
●加利福尼亚大学戴维斯分校动物实验ZX主任Yi-Je (Jay) Chen为你演示造脑损伤模型,教你如何在30分钟内,制作高存活率年轻小鼠和老龄小鼠MCAO模型!
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MCAO造模技巧
1.动物选择
大鼠:SD或Wistar大鼠,体重260-280克;
小鼠:C57/B6或CD-1,体重27-30克;
灵长类动物:Marmoset,macaques,体重2.5-5.0千克。
2.操作要点(小鼠)
●颈正中切口,分离周围组织,显微镜下暴露颈总动脉,颈外动脉和颈内动脉;
●分离颈外、颈内动脉和翼颚动脉,可结扎翼颚动脉,保持颈总动脉的WY分支颈内动脉的开放;
●将包有硅胶的1.5厘米长的6-0尼龙线栓小心地从颈外动脉插入颈内动脉,直至大脑中动脉的起始处,线栓大约插入10±0.5毫米;
●若要恢复大脑中动脉的血流,只需把线栓拔出,使头端退到颈外动脉,颈总动脉血流就可以再灌注到中动脉;
●缝合伤口皮肤,等动物麻醉苏醒后放回笼中即可。
视频操作讲解
Yi-Je (Jay) Chen的MCAO实操课程
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MCAO造模注意事项及答疑
1.注意事项
●血压
●体温
●线栓进线深度和线栓包裹
●动物的品系和梗死体积
●血糖对梗死体积的影响
●脑水肿对梗死体积的影响
●梗塞时间对梗死体积的影响
2.常见问题解答
●没有引起梗塞,常见原因有哪些?
●线栓插入翼颚动脉,并未阻塞大脑中动脉的起始端。
●线栓进线长度不够,没有刚好到达大脑中动脉的起始端。
●线栓粗细与血管内径不符,未能起到完全梗塞的目的。
●部分鼠存在大脑中动脉变异,虽然模型制作过程中操作没有技术性问题,有时仍可能不成功。
●梗塞时间太短,未能引起脑组织缺血坏死。
●梗塞面积差异大的原因有哪些?
●硅橡胶包裹长度不一致,导致梗死体积不稳定。
●造成蛛网膜下腔出血,模型制作不成功。
●小鼠后交通动脉发育异常,大鼠不存在此问题。
●没结扎大鼠翼颚动脉,影响大脑中动脉血流。
以上仅为课程节选片段,
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2021-01-26 -
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