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高通量测序NGS助手—Feyond-F100荧光酶标仪

发布:杭州奥盛仪器有限公司
浏览次数:227

文库的质量对于高通量测序(NGS)产出的数据质量至关重要,低估或高估文库质量都会严重影响测序的效果。目前,Z常用的定量试剂,是以Picogreen为主要成分的荧光染料,当其与DNA双链结合后,才能发出荧光,且所产生的荧光在一定范围内与DNA浓度呈正比,从而起到对DNA样本的精 准定量。


与这类试剂搭配Z常见的仪器,应是荧光计和荧光酶标仪。常见的荧光计有Thermo的Qubit4和Qubit Flex,还有奥盛自有产品Fluo-200和Fluo-800,但荧光计的通量较少,Z多只能做到8通道,若要同时进行8通道的样品检测,还需同时进行8通道的标品校准,非常浪费试剂。而选用荧光酶标仪作为检测工具时,虽然检测通量有所增大,但面临着标准曲线建立的问题,由于荧光染料受环境的影响较大,因此在每次进行样品检测时,都需要重新建立一条标准曲线,若标曲线性不够理想,还需重新配制标曲,增加实验负担。

奥盛Feyond-F100荧光酶标仪不仅可进行常规的细胞活性、GFP、RFP、ORAC、Ca2+流分析等荧光实验,新增的定量检测功能集荧光计的便利与酶标仪的高通量于一身,无需建立标准曲线,仅需校准标品点,即可实现96个样品的精确定量,Z 低检出限达0.1ng/uL(10uL样本量)。


特色功能

除常规荧光检测外,新增定量模式

图1 Feyond-F100主界面图

仅需布局两个标品点,即可完成曲线校准

图2 标准品校准界面

内置标曲,调用即可,也可自行建立曲线保存

图3 标准曲线界面

仅需输入样品体积,检测结果一目了然

图4 结果显示界面


性能优异

标品性能验证

将10ng/uL标品梯度稀释成8、6、4、2、1、0.4、0.2ng/uL。样本量为1uL或10uL时,Feyond-F100与Q的偏差均在10%以内。

表1 标准品检测结果

体积

样品类型

Q定量

Feyond-F100

差值

偏差

10

标品

0.189

0.1941

-0.0051

-2.7%

10

标品

0.378

0.3854

-0.0074

-2.0%

10

标品

0.982

0.9739

0.0081

0.8%

10

标品

1.93

1.9675

-0.0375

-1.9%

10

标品

4

4.0883

-0.0883

-2.2%

10

标品

5.94

6.0796

-0.1396

-2.4%

10

标品

7.78

7.8077

-0.0277

-0.4%

10

标品

10.2

10.0803

0.1197

1.2%

1

标品

1.03

1.095

-0.065

-6.3%

1

标品

1.92

1.997

-0.077

-4.0%

1

标品

4.1

4.12

-0.02

-0.5%

1

标品

6.18

6.043

0.137

2.2%

1

标品

8.14

7.895

0.245

3.0%

1

标品

10.5

10.059

0.441

4.2%


文库及核酸定量

在测试文库样本及cfDNA样本时,Feyond-F100与Q的偏差也可在10%以内。

表2 样品检测结果

体积

样品类型

Q定量

Feyond-F100

差值

偏差

1

文库

104

105.079

-1.079

-1.0%

1

文库

74.2

74.102

0.098

0.1%

1

文库

77.4

75.628

1.772

2.3%

1

文库

22.6

22.245

0.355

1.6%

1

文库

Out of range

148.53

/

/

1

文库

52.4

53.455

-1.055

-2.0%

1

文库

84.6

87.402

-2.802

-3.3%

1

文库

11.5

10.8

0.7

6.1%

2

cfDNA

0.456

0.482

-0.026

-5.7%

2

cfDNA

1.27

1.287

-0.017

-1.3%

2

cfDNA

0.625

0.622

0.003

0.5%

2

cfDNA

0.758

0.794

-0.036

-4.7%

2

cfDNA

1.45

1.522

-0.072

-5.0%

2

cfDNA

1.48

1.542

-0.062

-4.2%


注:上述实验数据来源奥盛实验室



关于奥盛

奥盛定位生命科学工具提供商,专注生命科学检测设备及自动化解决方案。公司围绕生物样品核酸蛋白纯化、自动化工作站,生物吸收光、荧光及发光检测三大技术平台,在生命科学领域进行了深度布局。

目前,公司拥有省级高新技术企业研究院,是2022年第 一批浙江省”专精特新”中小企业。

2024-03-28
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