使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计测定丙氨酸氨基转移酶催化活性浓度

本研究参照《IFCC 在 37 °C 酶催化活性浓度测量的原级参考方法第 4 部分：丙氨酸氨基转移酶催化浓度测定参考方法》^[1]，使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计对丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 的催化活性浓度进行监测。该方法中的基本原理是：在 37 °C 的恒温条件下，L-丙氨酸与 2-酮戊二酸在 ALT 的催化下生成丙酮酸和 L-谷氨酸，丙酮酸与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH) 在乳酸脱氢酶的作用下生成乳酸和 NAD+（如以下反应方程式所示）；然后通过监测 339 nm 下 NADH 的氧化速率（即吸光度的下降速率）来测定丙氨酸氨基转移酶的催化活性浓度，二者呈正比关系。