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仪器网/ 应用方案/ Z新文章步步登高 | 安捷伦2D-LC液相色谱中药/天然产物应用快报(下篇)

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安捷伦始终致力于 2D-LC 等新技术的投入和研发,创造出更为先进的色谱分离技术并不断改写历史。选择安捷伦 2D-LC,让您的实验室获得分离能力更强、更灵活、更易用的二维液相色谱分离方案


安捷伦 2D-LC 主要提供两种不同的分离模式:中心切割 2D-LC 和全二维液相(LCxLC)。其中,中心切割 2D-LC 又包含(多)中心切割(MHC)和高分辨率采样(HiRes)模式:


多)中心切割(MHC)

将一个或多个感兴趣的峰贮存,随后在第二维中进一步分析。


 高分辨率采样(HiRes)

将某个感兴趣的峰进行多次切割并比较不同位置的结果,例如用于获得可靠的定量结果。


 全二维液相(LCxLC)

将全部一维分离的流出物以等量的方式切割并全部进入第二维分析,从而获得更全面的结果。

安捷伦 2D-LC 解决方案可帮助您分离共洗脱化合物并实现Z 高的峰容量。在需要提高分离度时,可以利用中心切割和高分辨率采样,或利用全二维液相色谱分离复杂混合物。使用二维液相色谱使待测物与不挥发的缓冲盐分离且与 MS 检测兼容:


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2D-LC 的主要应用优势


中药/天然产物因其自身的复杂特性,在分离测定时,要求仪器不仅要能实现对中药及天然产物的简单化学成分及组成分析,还要实现对同品种中药的化学聚类及溯源分析、正 品与混淆品的特征差异性分析以及复 方组成及代谢分析。而二维液相色谱技术在中药质量研究中的应用,实现了新型液相色谱技术在中药分析中的突破性应用,全面且有效地提升了上述中药/天然产物分析的水平


安捷伦二维液相色谱解决方案,以性能优异的液相色谱硬件、二维控制/采集软件为基础,全面实现全二维液相色谱(2D-LC)、(多)中心切割二维液相色谱分析和高分辨率采样分析;同时,安捷伦二维液相色谱系统也全面兼容安捷伦质谱系统,质谱系统软件可完全控制二维系统以实现全部二维功能。这使二维系统不仅可在需要时提高分离度解决复杂的分离问题,也可以同时获得质谱相关定性定量结果,实现分离和定性一次完成,符合中药/天然产物快速、准确分析的要求。


ZhangPeng Shang, Lulu Xu, Yao Xiao 等在 2021 年发表于《Journal of Chromatography A》的文章《A global profiling strategy using comprehensive two-dimensional liquid chromatography coupled with dual-mass spectrometry platforms: Chemical analysis of a multi-herb Chinese medicine formula as a case study》中,通过使用安捷伦 1290/1290 2D-LC 对含有 11 味中药的小儿肺热咳喘颗粒中的成分进行分离,对比 UV 和双质谱检测器平台的检测数据,Z 终在 46 分钟内鉴定了 108 种化合物及额外的 151 种化合物。2D-LC 和双质谱检测器相结合,构建了一种用于多组分全局分析的普适性强大分析平台。


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 2D-LC 和双质谱系统的工作流程策略


A. Acquaviva, G. Siano等在 2020 年发表于《Journal of Chromatography A》的文章《Chiral × achiral multidimensional liquid chromatography. Application to the enantioseparation of dintitrophenyl amino acids in honey samples and their fingerprint classification》,使用了配有 2 位 /8 通阀的安捷伦 1290 Infinity II 2D-LC 系统的全二维(LC×LC)分离模式,构建了基于手性分离×反相的分离系统,对蜂蜜样品中氨基酸的分离进行了优化(包括影响峰容量的关键参数如正交性、采样频率等),Z 终鉴定出不同蜂蜜样品中存在的不同氨基酸种类。仅需通过简单的构建,即可实现多维液相色谱在分离复杂样品时,提高峰容量的目标。这是S次将全二维 2D-LC(LC×LC)应用于复杂天然样品中氨基酸的对映体分离。



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全二维 2D-LC(LC×LC)系统的模块配置和流路图

绿色框代表第 一维,橙色框代表第二维


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优化 12 个化合物在Z 佳色谱条件下,苯基 (A)和 C18(B) 色谱柱中 DNP- 氨基酸的手性×非手性分离等线图


沈灿杰、马阳等在 2022 年发表于《中草药》的文章《多中心切割二维液相色谱法同时测定九味熄风颗粒中 10 种成分》中,使用了配以双 2 位 /4 通阀的安捷伦 Infinity 1290II 2D-LC 系统的多中心切割模式(MHC),对由天麻、熟地黄、钩藤等 9 味药材组成的九味熄风颗粒中次黄嘌呤、天麻素等 10 种成分进行了测定,建立了含量测定方法。由于九味熄风颗粒中 10 种成分极性与含量差异大,使用传统一维色谱时,不同类型的色谱柱均难以达到目标物的全部分离。而使用 2D-LC 系统多中心切割模式(MHC),选择性的将第 一维中难以分离的目标组分切割至第二维色谱中,从而实现 10 种组分的全部定量分析,系统方法学验证结果表明本法的专属性、稳定性、重复性、准确度均较好,2D-LC 的分离能力明显优于一维液相。


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多中心切割(MHC)二维液相系统连接示意图


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1-次黄嘌呤 2-天麻素 3-原儿茶酸 4-新绿原酸 5-绿原酸 6-马钱苷酸 7-隐绿原酸 8-獐芽菜苦苷 9-龙胆苦苷 10-当药苷

混合对照品 (A) 和 JXG 样品 (B) 的一维 (1D) 和二维 (2D) 分离色谱图


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