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解决方案
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人参皂苷的检测方法(HPLC)
发布:深圳逗点生物技术有限公司浏览次数:1392【概述】
人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。主要存在于人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、 抗衰老等作用,因而成为研究的目标。本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。
【实验/设备条件】
仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000
色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
流动相:A:水 B:乙腈
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:1.0 mL/min
柱温:35℃
进样量:20 μL
检测器:紫外检测器
检测波长:203 nm
【样品提取】
称取1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。
备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。
【实验/操作方法】
活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。
上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱,
,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容,过PTFE滤膜,上机。
表1 梯度洗脱程序
时间/min
A/%
B/%
0.0
82
18
40.0
79
21
42.0
74
26
46.0
68
32
55.0
60
40
65.0
60
40
75.0
0
100
80.0
82
18
90.0
82
18
【实验结果/结论】
一、
(1)加标回收实验结果
表2 三种人参皂苷的加标回收结果
目标物
加标浓度 (mg/kg)
回收率(%)
平均回收率(%)
RSD(%,n=3)
RG1
500
89.34
87.03
85.74
87.37
2.09
RE
500
98.38
106.0
103.4
102.6
3.79
RB1
500
95.17
90.86
92.19
92.74
2.38
(2)三种人参皂苷色谱图
图1 三种人参皂苷的色谱图
【仪器/耗材清单】
货号
描述
包装
COD101124000
Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL
50支/盒
BN24
biocomma® 智能水浴氮吹仪
1台/箱
SF130-22-PTFE
PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系
100个/盒
SC2-1
2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425
100个/盒
V2-AL
2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425
100个/盒
2022-02-15相关仪器 -
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