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对蛋白同化制剂及其他禁用物质检测分析

发布:赛默飞色谱与质谱中国
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【概述】

    “蛋白同化制剂”又称同化激素,俗称合成类固醇(anabolicsteroids,AS),是合成代谢类药物,具有促进蛋白质合成和减少氨基酸分解的特征,可促进肌肉增生,提高动作力度和增强男性的性特征。但如果出于非YL目的而使用(滥用)此类药物则会导致生理、心理的不良后果,因此世界反兴奋剂机构(WADA)把AS列入禁用物质名单。然而,兴奋剂AS检测难度很大,不仅要定量AS的浓度,还要尽可能多的筛出这些禁用物质,而涵盖的禁用物质结构各异,化学性质差异较大,浓度线性范围也宽,使得分析更加困难。

      TSQ 8000 Evo具备ZL的快速碰撞池技术,结合Timed-SRM扫描方式,可在35min内实现5496个离子对的同时采集分析,高达七个数量级的宽线形范围为离子检测系统,而方法学指标基本不受影响。TraceFinder工作站具有非常强大的QAQC功能,通过对保留时间、定量/性离子对及离子对比率等关键定性指标及相关辅助定量指标设置阈值,贴心的Flag功能通过不同颜色直观的显示是否符合要求。由此,分析人员可从大量组分或者大量样品中,快速筛查出可疑的阳性组分或者阳性样品。

【实验/设备条件】

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部分SRM离子对信息如下:

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【实验/操作方法】

本文利用TSQ 8000 Evo三重四极杆气质联用仪,结合TraceFinder工作站,建立了高通量筛查分析的一般工作流程。

【实验结果/结论】

1.方法建立

      赛默飞拥有共计124个药物及其代谢物SRM参数数据库,每种化合物均包括保留时间、离子对及碰撞能等信息。只需从数据库中挑选要做的组分,直接导入到采集方法中,即可完成方法建立。当然,如果数据库中全部化合物都导入到方法里,则可实现该范围内的筛查分析。Timed-SRM扫描功能可大大提高保留时间漂移的容忍度。

图1.赛默飞124种化合物的数据库.png

图1.赛默飞124种化合物的数据库


2.筛查阈值设置

      多组分筛查分析时,一般是依据化合物保留时间、定量/性离子对、离子对比率进行判断是否检出。TraceFinder工作站可以对其进行设置,如下:

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图2.相关筛查阈值设置.png

图2.相关筛查阈值设置


     关于离子对比率计算方法,软件提供了manual、average、weighted average及level四种计算方式,可根据实际情况进行选择。关于离子对比率允差设置,软件提供了relativeabsolute两种计算方式及允差范围设置,可根据实际情况进行选择。

任何一项超出设置范围,TraceFinder工作站会通过相应的Flag显示。详见2、4部分。

3.QAQC阈值设置

      在定量分析中,可以选择性的设置一些阈值,使软件按照阈值自动判断诸如标准曲线、定量结果等数据的质量,从而节省时间和精力。任何一项超出设置范围,TraceFinder工作站会通过相应的Flag显示。详见4部分。

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图3.部分QAQC功能

4.Flag设置

       2、3部分简单的介绍了在筛查分析及日常定量分析中,TraceFinder工作站能够给分析人员提供的一些必要判断标准的选择。TraceFinder工作站允许分析人员根据实际需要对这些阈值规则进行修改并选择不同形式的Flag显示。具体设置界面如图4。

      本文中,为了描述方便,仅对confirming ions coelution、Ion ratio failure、NF(peak not found)等设定了相应的Flag。软件会自动帮分析人员快速的进行判断筛选,Z终通过Flag形式显示出来。由图 7 的一系列图可以直观的看出,有 29 种组分未检出,95 种组分确认检出。

       当目标组分数目少于样品数目时,采用Compound View功能查看,可以快速的进行不同样品间比较。见图8。也可以同时结合色谱峰进行比较查看,见图9。

图4. Flag设置界面.png

图4. Flag设置界面

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图7. Flag显示结果

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图8. Compound View功能

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图9.色谱峰视图

结论

通过介绍TraceFinder工作站的强大功能,建立了快速筛利用功能强大的TraceFinder工作站,结合TSQ 8000 Evo出色的性能,可显著提高筛查及高通量分析的效率。TSQ8000 Evo能够在保证良好的方法学指标基础上,29.5 min内完成数据库里所有化合物的同时分析。在此基础上,TraceFinder工作站可以预先设置相关的阈值,通过Flag功能直观显示出来,辅助分析人员快速的进行筛选判断。

【仪器/耗材清单】

TSQ 8000 Evo三重四极杆气质联用仪、TraceFinder工作站

2019-04-11
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