硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖的检测参考《GB/T 20365-2006》

　　氨基葡萄糖和硫酸软骨素具有补充软骨所需成分、保护软骨功能的作用，用于药品和保健品，市场需求量大。氨基葡萄糖是一种天然的氨基单糖，是葡萄糖的1个羟基被氨基取代后的化合物，硫酸软骨素是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-半乳糖胺以β-1,3糖苷键连接而成。

　　目前，对于硫酸软骨素和氨基葡萄糖的检测多采用高效液相色谱法，《GB/T 20365-2006 硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定 液相色谱法》规定了液相色谱法测定硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的方法。该标准适用于从牛、猪和鲨鱼等动物软骨组织中提取的硫酸软骨素及其中的盐酸氨基葡萄糖的测定。

　　迪马科技参照《GB/T 20365-2006》，用乙腈将硫酸软骨素样品分散均匀，以水溶解，分别使用Spursil C18-EP、Platisil ODS、Diamonsil C18(2) 三款反相色谱柱分离检测，硫酸软骨素与氨基葡萄糖的分离度分别为2.75、2.97、2.26，所得图谱数据可供大家参考。 

GB/T 20365-2006标准中的参考图谱

1、样品制备

标准溶液：称取25.0mg经105℃干燥4小时的硫酸软骨素标准品A和25.0mg盐酸氨基葡萄糖于烧杯中，加入5.0mL乙腈，振荡使其分散均匀，再加入水，超声使其溶解，转移至50mL容量瓶，用水定容至刻度，硫酸软骨素浓度约为0.5mg/mL，盐酸氨基葡萄糖浓度约为0.5mg/mL。

样品溶液：将粉末状样品在105℃干燥4小时，称取25.0mg样品于50mL烧杯中，加入5.0mL乙腈，振荡使其分散均匀，再加入水，超声使其溶解，转移至50mL容量瓶，用水定容至刻度，摇匀，经0.22μm微孔滤膜过滤。

2、分析条件

色谱柱：

Spursil C18-EP, 4.6x250mm, 5μm (Cat.#: 82106)

Platisil ODS, 4.6x250mm, 5μm (Cat.#: 99503)

Diamonsil C18(2), 4.6x250mm, 5μm (Cat.#: 99603)

流动相：乙腈/戊烷磺酸钠溶液*=10/90

流速：0.8mL/min

进样量：10μL

柱温：30℃

检测波长：192nm

*戊烷磺酸钠溶液：称取0.87g戊烷磺酸钠, 加入500mL水溶解

3、实验结果

Spursil C18-EP, 4.6x250mm, 5μm (Cat.#: 82106)

Platisil ODS, 4.6x250mm, 5μm (Cat.#: 99503)

Diamonsil C18(2), 4.6x250mm, 5μm (Cat.#: 99603)

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