EGFR 基因突变标准物质

Certified Reference Materials of EGFR Gene Mutation

    本标准物质为EGFR 基因突变检测标准物质，质粒 DNA 分子涵盖EGFR 基因的野生型、突变型和内参基因序列，可作为测量标准，用于 EGFR 基因突变定量检测和安全评价、相关产品认证认可等工作中的检测方法确认/验证、实验室测量质量控制等。

一、样品制备

    本标准物质以 pUC18 空白质粒为骨架载体，分别将设定的 EGFR 基因的野生型、突变型和内参基因序列整合到质粒 DNA 中，然后将质粒 DNA 转化到大肠杆菌中进行放大制备，并将制备得到的质粒

    DNA 通过柱层析、磁珠法等进行系列纯化和分析后，将所得到的 DNA 溶液在无菌洁净环境条件下分装到冻存管中。

二、溯源性及定值方法

    本标准物质的标准值（质粒 DNA 质量浓度）由高分辨电感耦合等离子体质谱（HR-ICP-MS）、液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）和液相色谱-同位素稀释质谱（HPLC-IDMS）三种不同原理的准确、可靠测量程序进行定值，参考值（突变基因和内参基因拷贝数浓度）采用数字 PCR 方法定值。标准物质的标准值可通过 GBW06502 国家一级标准物质的磷含量标准值和经检定/校准的天平等计量器具，溯源至 SI 基本单位：摩尔（mol）、千克（kg）。

三、特性量值及不确定度

    所赋特性量值的不确定度由定值测量、均匀性和稳定性等引入的不确定度分量合成得到。四、均匀性及稳定性评估

    参照JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用 HR-ICP-MS 和琼脂糖凝胶电泳相结合的方法，按照随机抽样原则对该标准物质进行了均匀性评估，方差分析结果表明，样品均匀性良好；采用HR-ICP-MS 和琼脂糖凝胶电泳相结合的方法，按照先密后疏的原则对该标准物质进行了 36 个月的稳定性考察，标准物质量值无方向性变化并通过平均值一致性检验，稳定性良好。

    研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、包装、贮存及使用

    1.包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 带内盖彩色冻存管包装，每管 50 μL。

    2.保存条件：置于-80 ℃冰箱中干燥保存。干冰运输。

    3.使用注意事项：本标准物质开瓶后一次性使用。使用前应先从冰箱内取出，平衡至室温并混匀。

六、合作单位

    北京雅康博生物科技有限公司

声明

1．本标准物质仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉，不予承担责任。

2．收到后请立即核对品种、数量和包装，相关赔偿只限于标准物质本身，不涉及其他任何损失。

3．仅对加盖“ZG计量科学研究院标准物质专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。

4．如需获得更多与应用有关的信息，请与技术咨询部门联系。