产品编号 | GBW10092 |
中文名称 | 转基因大豆MON89788质粒分子标准物质 |
英文名称 | Plasmid DNA Containing Genetically Modified MON89788 Soybean DNA Fragments |
规格 | 500μl |
形态 | 液态 |
基质 | 大豆 |
存储条件 | 建议-70˚C低温长期保存。 |
用途 | 蛋白质&核酸检测用标准物质/蛋白质&核酸检测用标准物质 |
注意事项 | 使用前应先从冰箱内取出,平衡至室温后再打开瓶盖使用样品开封后,应尽快恢复密封状态使用本标准物质制作标准曲线时,按照表1进行梯度稀释,然后再采用荧光定量PCR进行检测,引物和探针序列详见表2。 |
组分 | 标准值 | 不确定度 | 单位 |
---|---|---|---|
测序比值 | 1 | 0.04 | 基因比值 |
PCR比值 | 1.01 | 0.09 | 基因比值 |
产品详情
转基因大豆 MON89788 质粒分子标准物质
Plasmid DNA Containing Containing Genetically Modified MON89788 Soybean DNA Fragments
转基因大豆 MON89788 质粒分子标准物质可用于转基因大豆、食品和饲料等的定量检测、安全 评价、实验室质量控制、方法评价与验证、技术仲裁等。 一、样品制备
本标准物质是将转基因大豆 MON89788 转化体特异性序列和内标准基因片段共同构建于 pEASY-T3 载体,得到 pNIM-004 质粒分子,经提取,纯化和质量检测及均匀性初检合格后稀释至 4.02×106copy/μL 进行分装。
二、溯源性及定值方法
该标准物质采用测序法、数字 PCR 方法对转基因大豆 MON89788 转化体特异性基因片段和大豆 内标准基因片断的拷贝数比值进行定值测量。测序法测量结果作为标准物质测序比值标准值;数字 PCR 方法测量结果作为标准物质 PCR 比值标准值。本标准物质通过使用满足计量学特性要求的制备 方法、测量方法和计量器具,保证其量值溯源性。
三、特性量值及不确定度
编 号 |
标准值及不确定度 | |||
GBW10092 |
测序比值 | 扩展不确定度(%) (k=2) |
PCR 比值 | 扩展不确定度(%) (k=2) |
1.00 | 0.04 | 1.01 | 0.09 |
标准值不确定度评定考虑了定值方法、均匀性、稳定性引入的不确定度分量。
四、均匀性和稳定性考察
按照 JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》,采用采实时荧光定量 PCR 方法对 该标准物质进行均匀性检验研究,最小取样量 5μL,结果表明均匀性良好。按照先密后疏的原则采 用实时荧光定量 PCR 方法对该标准物质进行稳定性考察研究,标准值无方向性变化并通过平均值一 致性检验,表明稳定性良好。
本标准物质自定值日期起,有效期为 6 年,研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性,有 效期内如发现量值变化,将及时通知用户。
五、包装、储存及使用
1.包装与储存:本标准物质采用 2mL 立式拧口塑料离心管包装,500μL/瓶。建议-70?C 低温长期 保存。
2.使用注意事项:使用前应先从冰箱内取出,平衡至室温后再打开瓶盖使用。样品开封后,应 尽快恢复密封状态。
3.使用建议:使用本标准物质制作标准曲线时,按照表 1 进行梯度稀释,然后再采用荧光定量 PCR 进行检测,引物和探针序列详见表 2。
表 1 转基因大豆 MON89788 质粒分子标准物质梯度稀释说明
初始浓(copy/μL) | 终浓度(copy/μL) | 质粒 DNA(μL) | TE(μL) |
4.02×106 | 4.02×105 | 20 | 180 |
4.02×105 | 4.02×104 | 20 | 180 |
4.02×104 | 4.02×103 | 20 | 180 |
4.02×103 | 4.02×102 | 20 | 180 |
4.02×102 | 4.02×101 | 20 | 180 |
表 2 外源基因和内标准基因的引物及探针序列
基因名称 |
引物或探针 | 序列信息 (5’-3’) | 扩增片段长度 /(碱基) | |
外源基因 MON89788 | 上游引物 | TCCCGCTCTAGCGCTTCAAT |
139 | |
下游引物 | TCGAGCAGGACCTGCAGAA | |||
探针 | FAM-CTGAAGGCGGGAAACGACAATCTG-TAMRA | |||
内标准基因 Lec | 上游引物 | CCAGCTTCGCCGCTTCCTTC |
74 | |
下游引物 | GAAGGCAAGCCCATCTGCAAGCC | |||
探针 | FAM-CTTCACCTTCTATGCCCCTGACAC-TAMRA |
六、参考文献
[1] Delobel C.,Noens W., Querci M., Mazzara M., Cordeil S., Event-specific Method for the Quantificaiton of Soybean Line MON89788 Using Real-time PCR: Validation Report. 2008. Joint Research Centre, Institute for Health and Consumer Protection.
声明
1.本标准物质仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉,不予承担责任。
2.收到后请立即核对品种、数量和包装,相关赔偿只限于标准物质本身,不涉及其他任何损失。
3.仅对加盖“ZG计量科学研究院标准物质专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。
4.如需获得更多与应用有关的信息,请与技术咨询部门联系。
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