用近重直（小倾角 10º）转头快速分离 RNA

       超速离心机可进行生物大分子的分离，特别是大量样品样品纯化的时候，本文将介绍 使用 himac (前身为日立工机) 超速离心机及近垂直转头进行 RNA 快速分离的方法。

◆ 设备：Hitachi CP 100NX， 及 P90NT 转头

CP100NX

近垂直转头

◆ 溶液：

A 液：0.5％ SDS，20mM Sodium acetate  10mM EDTA (PH5.5) 

B 液：0.5％ Sodium N—lauroyl sarcosinate (N—月桂肌氨酸钠)  20mM Sodium acetate ,10mM EDTA (PH5.5) 

C 液：5.7M CsCl，0.1M EDTA (PH5.5)

◆ 离心顺序：

1．培养好的 E.coli 600 液，高速离心，50ml PP 或 PA 管，9200 rpm×20 分，4 ℃ 

2．每管沉淀加 1ml A 液，再加 1ml phenol 混匀，60℃，振荡器上摇 5 分钟 

3．混匀后注入 7ml PP 或 PA 离心管，每管试剂容量 5—5.5 ml （日立 CR22N 高速 冷冻离心机及 R22A 高速转头，18×7ml ），9400 rpm , 4℃离心 5 分钟。 

4．每管取出 800ul 上清液加入 2.5 倍乙醇，再加入 1.2 ml 溶液 B，Z终溶积为 4 ml。 

5．超速离心管（5PA 密封管），每管先加 2 ml 混合液，然后用注射器深入离心管底 部，每管加入约 3 ml 溶液 C 直到加满。 

6．用日立 STF3 自动熔封管器封口后(见下图)，放入 P90NT 转头 85,000rpm ，15℃， 离心 2 小时，加速“5”，减速“7”

注：不可超过 8.5 万 rpm，否则可能引起 CsCl 结晶。

STF3

结果： 

离心后 RNA 沉淀在离心管底部，DNA 在中下部溶液中。 

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（来源：天美（ZG）科学仪器有限公司）