原料乳及乳制品中三聚氰胺的检测

前言

三聚氰胺（Melamine），属于非蛋白类含氮有 机化学品，常作为化工原料用于塑料、包装材料 的生产工艺中。2008 年的多起婴儿肾结石病例的三聚氰胺奶粉事件轰动全国，使得三聚氰胺质量安全问题一度成为社会关注的焦点。 2011 年 4 月 6 日，卫生部等 5 部门在关于三聚氰胺在食品中的限量值的公告中明确规定：三聚氰胺不是食品原料，也不是食品添加剂，禁止人为添加到食品中。对在食品中人为添加三聚氰胺的，依法追究法律责任。

Abstract

本应用参考 GB/T 22388-2008  标准的检测方法，介绍了使用赛里安 LC6000 GX液相色谱仪（搭配紫外 检测器）检测原料乳及乳制品中三聚氰胺的应用方案。实验结果准确， 重复性优异、线性良好 (R²=0.9997)， 完全满足标准要求。

实验方法

原理：试样用三lyu乙酸 - 乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用GX液相色谱测定，外标法定量。

仪器：使用配备了 6100 泵、6210 自动进样器、6310 柱温箱和 6410 紫外检测器的赛里安 LC6000 GX液相色谱仪进行实验。使用 CompassCDS 工作站进行曲线拟合和数据分析。

三聚氰胺标准品：CAS 108-78-01，纯度＞ 99.0%

离子对试剂缓冲液：准确称取 2.10g 柠檬酸和 2.16g 辛烷磺酸钠，加入 980mL 水溶解，调 PH 至 3.0 后定容 1L备用。

三聚氰胺标准储备液：准确称取 100mg（精确到 0.1mg）三聚氰胺标准品于 100mL 容量瓶中，用流动相溶解并定容到刻度，配置成浓度 1mg/mL 的标准储备液于 4℃避光储存。

色谱条件

色谱柱：C18，5um， 4.6 mm x 250mm

流动相：离子对试剂：乙腈 = 10：90

流速：1.0ml/min 

柱温：40℃

进样量：20μL

检测波长：240nm

实验结果

图 1. 20 μg /mL 的 三聚氰胺标样色谱图

用流动相将三聚氰胺标准储备液逐级稀释得到浓度为 0.8、2.0、20.0、40.0、80.0 μg /mL 的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积 - 浓度作图，得到标准曲线回归方程。

图 2. 0.8-80 μg /mL 的 三聚氰胺标准曲线（R²=0.9997）

GB/T 22388-2008 中规定两次重复JD差值不得超过算术 平方值 10%。由图 3 和表 1 可知结果完全符合标准要求。

图 3. 20μg /mL 的三聚氰胺重叠色谱图（n=6）

表 1 三聚氰胺的保留时间和峰面积值重复性（n=6）

GB/T 22388-2008 中规定三聚氰胺定量限为 2 1.15mg/kg。对实际样品进行检测，从市场上随机购买了液体乳制品前处理后进行检测分析，结果为 1.15mg/kg 未超出标准限值。图 4 为实际样品谱图。

图 4. 实际样品中三聚氰胺的色谱图

实验结论

赛里安 LC6000 GX液相色谱仪提供了原料乳与乳制品中的三聚氰胺检测的解决方案。该方案使用 UV 检测器检测三聚氰胺完全符合 GB/T 22388-2008 的检测要求，线性优异（R²=0.9997），保留时间与峰面积重复性均符合标准要求（保留时间和峰面积 的 RSD％值分别为 0.028 和 0.97 ）。