慢病毒浓缩试剂盒

产品简介

慢病毒浓缩试剂盒中含有5×浓缩液，能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速地浓缩。该试剂盒操作简单，仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育，然后使用普通的离心机离心，即可获得浓缩的慢病毒颗粒，回收率高达90%以上，可提高100倍病毒滴度。为了加速科研进程，江苑生物还提供细胞基因过表达、shRNA/siRNA介导的基因沉默、CRISPR/Cas9介导的基因敲除等服务。

产品组分

保存条件

常温配送。4 ºC保存，1年有效。

注意事项

1．本产品为无菌液，请注意无菌操作。

2．本产品仅用于科学研究。

3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

1．收集慢病毒上清液，0.45 μm滤膜过滤，以除去细胞和碎片。

注：如果使用滤膜过滤，只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜（PES）膜，不能用硝酸纤维素膜（NC）。若没有0.45 μm滤器，将上清3000 rpm，4 ℃离心5 min，弃沉淀亦可。若上清较多，可以1500 rpm离心5 min，将细胞及碎片离心到管底，再进行过滤，防止堵塞滤器。过滤时，将注射器与滤器卡紧，轻柔推动活塞，防止用力过度造成滤器崩离注射器，使得病毒液四溅。

2．将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1的比例混合（上清液4份，浓缩液1份），4°C孵育过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下，进行3 次。

注：若时间不宽裕，可将孵育时间缩短为几小时。慢病毒颗粒在4 °C可以稳定保存数天。

3．于4°C，水平转子4000 g 离心25 min。

注：若使用角转子，病毒会被离心到管壁上，需仔细分辨管壁上的白色沉淀并将其冲洗下来。

4．小心去除上清，不要晃动管子，一般可见白色沉淀（有时沉淀不可见）。

5．用初始体积（原上清液体积）1/10 - 1/100的慢病毒溶解液、DMEM或PBS重悬病毒颗粒，小心吹打均匀，重悬沉淀物。

6．测定浓缩慢病毒样品的滴度，50 μL/管分装，于-80 °C冰箱保存。

注：病毒液一定要分装，切忌反复冻融，冻融一次病毒滴度将降低20-60%。

慢病毒滴度测定方法参考（江苑生物→新闻中心）

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