三聚氰胺快检——液相法

【概述】

本方案依据GB/T 22400-2008《原料乳中三聚氰胺快速检测液相法》，测试原料乳中的三聚氰胺含量。用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂，强阳离子交换色谱柱分离，GX液相色谱-紫外检测器检测，外标法定量。

一、主要仪器和试剂

a. LC220GX液相色谱仪，紫外检测器；

b. SCX（强阳离子交换）柱，250mm*4.6mm 5μm；

c. 三聚氰胺标准品；

d. 乙腈（色谱纯）。

二、实验方法

2.1 色谱条件

2.2 试剂配制

a. 三聚氰胺标准贮备溶液（1000 mg/L）：

称取100mg（准确至0.1mg）三聚氰胺标准物质，用水完全溶解后，100mL容量瓶中定容至刻度，混匀，4℃条件下避光保存，有效期为1个月。

b. 标准溶液A（200 mg/L）：

准确移取20.0mL标准贮备溶液于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

c. 标准溶液B（0. 50mg/L）：

准确移取0.25mL标准溶液A于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

2.3 按下表分别配置高标标准曲线系列浓度和低标标准曲线系列浓度。

2.4 样品处理

称取混合均匀的15g（精确至0.01g）原料乳样品，置于50mL具塞刻度试管中，加入30mL乙腈，剧烈振荡6min，加水定容至满刻度，充分混匀后静置3min，用一次性注射器吸取上清液用针式过滤器过滤后待测。

三、实验图谱汇总

3.1 实验图谱

标准样品图谱

原料乳样品谱图

空白试样谱图

空白加标谱图

3.2 标准曲线

高浓度曲线

低浓度曲线

3.3 重复性测试

3.4 结果计算

式中：

X——原料乳中三聚氰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

c ——从校准曲线得到的三聚氰胺溶液的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；

V——试样定容体积，单位为毫升（mL）；

M——样品称量质量，单位为克（g）。

原料乳中未检出三聚氰胺，加标回收率计算如下：