免疫球蛋白指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中,也见于其他体液、组织和一些分泌液中,是一类重要的免疫效应分子,由高等动物免疫系统淋巴细胞产生的蛋白质,经抗原的诱导可以转化为抗体。因结构不同可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE5种,多数为丙种球蛋白。
测定其氮含量可知其有效成分的含量,因此本实验参照《ZG药典 2020年版 通则0704 氮测定法 第三法 定氮仪法》对免疫球蛋白中的氮含量进行测定。
凯氏定氮仪测定免疫球蛋白中的氮含量
仪器与试剂
1、仪器
K1160全自动凯氏定氮仪,SH420F石墨消解仪,分析天平 。
K1160全自动凯氏定氮仪
2、试剂
硫酸(分析纯),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,400g/L氢氧化钠,混合催化剂(3gK2SO4、0.2gCuSO4),0.1mol/L硫酸标准滴定液。
实验方法
1、取样
使用移液管精密移取1mL样品,加入消化管。加入混合催化剂3.2g,沿消化管壁加入浓硫酸10mL。
2、消解
设定消解参数
消解参数设置
3、测试
定氮仪参数设置
结果与讨论
1、实验结果
免疫球蛋白中的氮含量测试结果
2、结论
测试结果显示本次测试的免疫球蛋白氮含量为5.385mg/mL和5.066mg/mL。且RSD值均小于0.5%,重复性良好。
参考文献
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[ M ] . 四部. 北京: ZG医药科技出版社, 2020: 附录0704氮测定法 第三法(定氮仪法)
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