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GX液相色谱法快速测定人参中皂苷类成分含量

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

1 测试原理

人参皂苷属于三萜类皂苷化合物,易溶于甲醇、乙醇,且含有糖链数量多的人参皂苷水溶性优于含有糖链数量少的人参皂苷或苷元。混合的人参皂苷随流动相进入色谱柱,含有糖链结构较少的人参皂苷先流出色谱柱,此外随着流动相中有机相所占比例的增加,人参皂苷的保留时间会变短,但是结构相似的人参皂苷分离度降低。因此,需要适合的梯度洗脱程序才能实现不同人参皂苷在较短的时间内的分离。


2 仪器设备与测试条件

人参皂苷属于三萜类皂苷化合物,易溶于甲醇、乙醇,且含有糖链数量多的人参皂苷水溶性优于含有糖链数量少的人参皂苷或苷元。混合的人参皂苷随流动相进入色谱柱,含有糖链结构较少的人参皂苷先流出色谱柱,此外随着流动相中有机相所占比例的增加,人参皂苷的保留时间会变短,但是结构相似的人参皂苷分离度降低。因此,需要适合的梯度洗脱程序才能实现不同人参皂苷在较短的时间内的分离。

仪器配置

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试剂耗材

人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、Rf、Rc、Rb2和Rb3;磷酸;甲醇;乙腈;超纯水。

测试条件

C18色谱柱柱温:25℃±1℃

进样量:20μL

流动相:乙腈(A)—0.1%磷酸水溶液(B)

流速:1mL/min

梯度洗脱程序:

20210517-1039963995.png

3 测试结果

色谱分离

8种人参皂苷的色谱分离图.png

8种人参皂苷的色谱分离图

线性关系

8种人参皂苷的线性关系考察结果

8种人参皂苷的线性关系考察结果.png

精密度

精密度测试曲线

精密度测试曲线.png

精密度数据表

精密度数据表.png

精密度加标回收率

空白加标回收率数据表

空白加标回收率数据表.png

4 结论

本方案使用SY-9100液相色谱仪,在25℃±1℃柱温条件下,以乙腈—0.1%磷酸水溶液为流动相,按一定的梯度洗脱程序,实现了对8种人参皂苷的分离分析测定。标准溶液的校正曲线线性良好,相关系数r均大于0.999;8种人参皂苷混合标样重复6次进样的峰面积RSD<1.0%;空白加标回收试验的回收率均在96.08%~107.59%,RSD≤4.59%,该方法具有良好的稳定性和准确度。

与2020版ZG药典和《GB/T 22996-2008 人参中多种人参皂苷的测定 液相色谱-紫外检测器》中对人参总皂苷的检测方法相比,该方案增加了可同时检测的人参皂苷的种类;与目前文献中人参皂苷检测方法相比,本方案能够达到更低的定量限,为市场上人参皂苷产品质量控制提供了更GX准确的解决方案。

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