摘要/目标:提出一种利用高速相差及亮视场实现的显微镜成像方法。该方法在保证图像质量的前提下,实现较传统方法快30倍的大尺寸细胞培养皿扫描成像。在该方法中,被观测的样本被持续移动,由频闪光源负责照亮样品,使该样本可以被清晰拍摄。频闪光源较短的闪烁时间,可避免因样本运动而产生的成像模糊。在扫描的过程中,由先进的自动对焦系统保证对样品的自动对焦。显微镜物镜的放大率决定视场的大小。由于显微镜的视场较小,例如微量滴定板(MTPs)的成像,则需要拍摄大量单张照片,由这些照片去拼接,完成对尺寸较大样本的完整成像。在传统的显微镜扫描成像中,由步进扫描程序去完成扫描成像。扫描程序会不断对样品进行定位、对焦,并拍摄整个样品的一小部分画面。对微量滴定板(MTPs)进行上千次的成像定位是非常耗时的。通过在样品移动过程中持续拍摄,省去暂停移动拍摄样品的时间,可大幅提升拍摄的速度。早在10年前,已有论文提出这种被称为连续扫描的成像方法,该方法可以基于线或面摄像机实现成像。连续扫描成像法的关键点在于在样品的持续移动中保持对焦,同时需要避免由样品移动所产生的模糊成像。
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